[發(fā)明專利]一種HPLC法測定L-半胱氨酸含量的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410633050.3 | 申請日： | 2014-11-12 |
| 公開（公告）號： | CN104316618A | 公開（公告）日： | 2015-01-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李慧;喬春蓮;馮小路;周靜;楊波 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢武藥科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 北京中譽威圣知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11279 | 代理人： | 蔣常雪 |
| 地址： | 430074 湖北省*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 hplc 測定 半胱氨酸 含量 方法 | ||
1.一種高效液相色譜法測定樣品中L-半胱氨酸含量的測定方法，其特征在于采用正相硅膠鍵合二醇色譜柱，以混合溶劑為流動相的色譜法進行測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的混合溶劑為乙腈和緩沖鹽溶液的混合溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的乙腈和緩沖鹽溶液的體積比例為75:25～85:15，最優(yōu)為80：20。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的緩沖鹽為磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項所述的方法，其特征在于分析L-半胱氨酸膠囊中L-半胱氨酸含量的方法包括以下步驟：
(1)取L-半胱氨酸對照品適量，精密稱定，用pH為1.2的緩沖溶液(3.728gKCl和7mlHCl溶解于1000ml水中)溶解樣品，得到1ml含L-半胱氨酸0.20mg的溶液，作為對照品溶液。
(2)設(shè)置溶劑pH值為1.8～7.0，檢驗波長為200nm，色譜柱柱溫箱為25～40℃。
(3)取L-半胱氨酸膠囊樣品20粒，除去膠囊殼，得到內(nèi)容物，用研缽研細，取相當(dāng)于L-半胱氨酸20mg的細粉，精密稱定，置量瓶中，加入適量溶劑，在快速混勻器上震蕩15min后，稀釋至對照液的濃度，搖勻；用0.45μm的濾膜過濾，棄去初濾液后，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
(4)取對照品溶液和供試品20μl注入液相色譜儀，采用外標法計算L-半胱氨酸的含量。
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