[發明專利]脫氫樅酸基芳胺化合物作為金屬離子熒光探針的應用

有效

• 申請號: 201410629336.4
• 申請日: 2014-11-10
• 公開（公告）號: CN104535546B
• 公開（公告）日: 2017-02-15
• 發明（設計）人: 高宏;宋湛謙;商士斌
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林產化學工業研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙)32249
• 代理人: 馮慧

技術領域

本發明涉系列脫氫樅酸基芳胺化合物及其作為熒光探針在檢測生物組織或者環境中金屬離子的應用，屬于生物化學領域。

背景技術

金屬離子廣泛地存在于自然界中,其中的一些在生命過程中具有重要的功能,而另外一些則在很低濃度時就對生物具有極強的毒性。對金屬離子識別、檢測、定性分析有重要意義，尤其對于個別過渡金屬及重金屬離子，用常規的分析手段難以得到滿意的效果。用熒光分子探針檢測金屬離子具有實時檢測、低檢測閾值、高靈敏度和易于操作等特點，是非常行之有效的方法。在傳統的受體分子上連接熒光分子體系進行識別和檢測金屬離子的基本原理就是利用金屬離子對受體分子熒光信號的影響,如熒光的增強或減弱,光譜的移動，熒光壽命的變化等實現對金屬離子的檢測。利用熒光分子探針實時快速高效檢測各種環境樣品及生物組織中的金屬離子識別具有潛在的實用價值。采用熒光分子探針檢測銅、鐵等金屬離子已有相關文獻報道，熒光分子探針種類較多，但許多有機熒光分子探針化合物常常受質子的影響而導致響應的光譜性能發生改變，難以確保檢測結果的準確性。現有的金屬離子熒光探針合成相對復雜，一些探針分子合成產率較低。申請人前期合成了系列脫氫樅酸基芳胺熒光化合物，研究發現它們具有很好的熒光性能，并可以作為熒光探針應用于腫瘤細胞的探測(CN103215033A)，而對于它們作為金屬離子熒光探針的研究未見報道。

發明內容

本發明目的在于提供一類脫氫樅酸基芳胺化合物作為金屬離子熒光探針的應用，選擇性好、靈敏度高特別針對在溶液中對金屬離子進行檢測方面的應用。

本發明的技術方案為：一類脫氫樅酸基芳胺化合物作為金屬離子熒光探針的應用，所述的脫氫樅酸基芳胺化合物具有如下式所示的結構：

本發明設計、合成的熒光離子探針a，b對金屬鐵離子、探針c對銅離子可以靈敏識別，選擇性好，靈敏度高。將此類探針應用于生物樣品或者環境中金屬離子的識別和檢測具有較好的應用前景。

附圖說明

圖1探針a,b,c(濃度10^-5mol/L)中加入不同金屬離子(濃度1×10^-5M)熒光強度。

圖2探針a,b,c(濃度1×10^-5M)的積分熒光強度對不同金屬離子(濃度5×10^-5M)的響應。柱狀圖代表加入金屬離子后積分熒光強度(F)與加入金屬離子前積分熒光強度(F₀)的比值(F/F₀)。

圖3其它金屬離子(濃度1×10^-5M)對探針a,b,c(濃度1×10^-5M)識別Fe³⁺，Cu²⁺離子的干擾，以柱狀圖表示：加入金屬離子后積分熒光強度(F)與加入金屬離子前積分熒光強度(F₀)的比值(F/F₀)

圖4、5、6為探針基團分別為a,b,c(濃度10^-5mol/L)的熒光強度隨金屬離子濃度變化圖(金屬離子濃度范圍0.1～30×10^-6mol/L)，內插圖：熒光強度與金屬離子濃度關系。

具體實施方式

按照發明專利號為201210236120.2，名稱為脫氫樅酸基二芳胺類化合物及其合成方法和應用中實施例1中記載的方法制備得到實施例2制備得到實施例4制備得到

實施例1?所需測試溶液的制備

H?epes(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)緩沖溶液的配制:

將1.19g?Hepes溶解在400mL蒸餾水中,加0.5mol/L的NaOH水溶液調節至pH7.36(Hepes的有效pH范圍為6.8～8.2),然后用蒸餾水定容至500mL，于4℃保存。

探針溶液的配制：

將探針a,b,c用甲醇溶解配制成1×10^-3mol/L的溶液，移取1mL用配制好的Hepes緩沖溶液稀釋定容，配制成濃度為1×10^-4mol/L的待用探針溶液。

各種金屬離子溶液的配制:

準確稱量0.01mmol金屬離子，用少量蒸餾水溶解,后用蒸餾水定容至10mL,配制成濃度為1.0×10^-3mol/L的測試用金屬離子溶液。為消除陰離子對探針識別的影響。所有金屬離子溶液均采用其鹽酸鹽或鹽酸鹽水合物來配制。

實施例2?金屬離子選擇性測試