[發明專利]反柄靈芝酚A和B及其藥物組合物與其在制藥和食品中的應用

有效

• 申請號: 201410624823.1
• 申請日: 2014-11-07
• 公開（公告）號: CN104447783B
• 公開（公告）日: 2017-02-15
• 發明（設計）人: 程永現;豆曼;邸磊;呂青
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10;C07D311/94;A61K31/357;A61K31/352;A61P13/12;A23L33/105
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙)53108
• 代理人: 馬曉青

技術領域：

本發明屬于藥物技術和食品領域，具體涉及反柄靈芝酚A和B及其藥物組合物，以及其在制備治療腎臟纖維化或慢性腎病的藥物或保健食品中的應用。?

背景技術：

慢性腎病的危害、病理機制及藥物研究的方法和原理，本發明人在已公開的中國專利(公布號：CN?102153630A)中均有明確的描述。由于藥物、飲食等諸多因素影響，慢性腎病的發病率已超過10％，慢性腎病進展至腎衰竭時就只能依賴腎移植和血液透析。但由于治療藥物的缺乏，慢性腎病目前尚無好的干預方法。?

研究表明慢性腎病包括纖維化過程中均伴有細胞外基質如collagen?I、纖粘連蛋白(fibronectin)過度分泌，α-SMA表達升高。TGF-β/Smad3磷酸化是導致上述指標升高的重要原因之一，該通路Smad3的磷酸化也是其它臟器纖維化的主要原因之一。因此，觀察化合物對腎小管上皮細胞膠原蛋白分泌的影響，或觀察其對TGF-β1誘導的腎小管上皮細胞Smad3磷酸化的抑制作用，已成為目前研究慢性腎病包括腎纖維化藥物的常用方法。但目前關于這方面的小分子藥物還比較缺乏。?

靈芝被稱為仙草，中藥之王，我國有近百種。靈芝自古為名貴中藥，在我國已有2000多年應用歷史，據稱靈芝可治療百病，其不僅在我國，且在東亞和美國都有應用。我國關于靈芝的保健品眾多，表明其功能備受關注。反柄靈芝(Ganoderma?cochlear)市場流通，具有與《中華人民共和國藥典》I部收載的紫芝類似的功效。本發明人認為其可能含有抗慢性腎病活性物質，而現有技術中未見有本發明涉及的化合物及其抗慢性腎病的相關報道。?

發明內容：

本發明的目的在于提供具有抗慢性腎病或腎臟纖維化價值的化合物反柄靈芝酚化合物(+)-或(-)-Cochlearol?A[(+)-1或(-)-1]和(+)-或(-)-CochlearolB[(+)-2或(-)-2]；及其該發明的化合物在制備抗慢性腎病和/或抗腎臟纖維化的藥物中的應用，以及以該化合物為有效成分的藥物組合物。?

本發明的上述目的是由下述的技術方案得以實現的：?

具有下述結構式的反柄靈芝酚化合物(+)-或(-)-Cochlearol?A[(+)-1或(-)-1]和(+)-或(-)-Cochlearol?B[(+)-2或(-)-2]，(其中cochlearol?A的晶體結構，其晶體數據存于Cambridge?Crystallographic?Data?Centre?withno.CCDC1012020)，?

制備所述的反柄靈芝酚A和B的方法，取反柄靈芝，粉碎，用70％乙醇室溫提取，合并提取液并減壓回收溶劑得粗提取物，將粗提取物混懸于適量水中，然后用等體積乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，減壓濃縮得乙酸乙?酯萃取物，經硅膠柱層析，100:0，99:1，98:2，97:3，96:4，95:5，94:6，93:7，92:8，90:10，85:15，80:20，50:50的氯仿-甲醇系統梯度洗脫，每種溶劑梯度為1.5倍柱體積，按照每份500mL收集得7個合并組份；組份4經SephadexLH-20(MeOH/H₂O,80:20)柱層析得7個亞組份，其中組份4.7經RP-18柱層析(MeOH/H₂O,10％-60％)，TLC檢測合并斑點相同組分，該合并組分經半制備RP-HPLC(MeOH/H₂O,78％)純化得化合物2，該化合物為消旋體，經手性拆分(CHIRALPAK?IC：正己烷/乙醇，75:25)得化合物(-)-2(0.55mg)和(+)-2(0.53mg)；組分5經MCI?gel?CHP?20P柱層析(MeOH/H₂O,10％-50％)得5個亞組分，組份5.1經Sephadex?LH-20(MeOH/H₂O,80:20)柱層析，根據薄層顯色跟蹤合并相同流份得5個組分，其中組分5.1.5經反相RP-18柱層析，10-60％的甲醇-水洗脫，薄層指導合并斑點，然后經半制備反相RP-18高效液相色譜純化(MeOH/H₂O,43％)，得化合物1，該化合物為消旋體，經手性拆分(CHIRALPAK?AD-H：正己烷/乙醇(含0.05％甲酸)，72:28)得化合物(-)-1(1.08mg)和(+)-1(0.98mg)。?

治療慢性腎病或腎臟纖維化的藥物組合物，含有治療有效量的上述化合物和藥學上可接受的載體。?