[發明專利]食用植物油中9種營養物的檢測方法

有效

• 申請號: 201410620656.3
• 申請日: 2014-11-06
• 公開（公告）號: CN104330496A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 顧強;乙小娟;石晶;劉一軍;張慧;陳忍忍;申進玲;王玥;邵景東
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國張家港出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 黃春松

技術領域

本發明涉及植物油中營養物檢測技術領域，具體涉及食用植物油中的植物甾醇和三萜烯二醇中9種營養物的檢測方法。

背景技術

食用植物油的主要成分包括甘油三脂(95-98％)和不皂化物(2-5％)。不皂化物中的主要成分為植物甾醇和三萜烯二醇，植物甾醇和三萜烯二醇中主要的9種營養物為：高根二醇、熊果醇、麥角固醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、巖藻甾醇、豆甾醇、膽固醇、β-谷甾醇，該9種營養物在食用植物油中的營養價值已得到普遍認同，添加相關營養物的營養強化植物油已經逐漸走向市場。

傳統的食用植物油中的植物甾醇和三萜烯二醇的檢測方法較多，檢測方法中的關鍵一步是：將食用植物油中的甘油三脂與不皂化物進行分離后得到不皂化物，即對食用植物油進行凈化前處理。如目前國內甾醇測定的標準方法GB/T25223-2010(等同ISO12228：1999)中采用氣相色譜儀(GC-FID)進行檢測，其前處理工作包括皂化、萃取、薄層層析、硅烷化四個步驟，這四個步驟均需要進行手工操作，操作起來繁瑣、復雜，而且還容易導致重復性差等問題，并且利用該方法檢測需要三天左右的時間，耗時極為漫長；此外，國際上還有一種高效液相色譜質譜法(HPLC-MS)，此方法的前處理過程中雖然省去了薄層層析和硅烷化步驟，但依然需要皂化、萃取，而皂化和萃取依然需要手工操作，因此該方法操作起來仍然十分繁瑣復雜。

發明內容

本發明的目的是：提供一種易操作、自動化程度高、穩定性好、靈敏度高、檢測時間短的食用植物油中9種營養物的檢測方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：食用植物油中9種營養物的檢測方法，所述的9種營養物為高根二醇、熊果醇、麥角固醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、巖藻甾醇、豆甾醇、膽固醇、β-谷甾醇，所述的檢測方法包括以下步驟：一、將待測的食用植物油溶解在體積比為1∶1的環己烷和乙酸乙酯的混合溶劑中制得食用植物油溶液，所述的食用植物油溶液的濃度為10～50g/L；二、將第一步中制得的食用植物油溶液注入至制備型凝膠滲透色譜儀中進行凈化，所述的制備型凝膠色譜儀的凈化條件為：凝膠色譜柱為300mm×20mm，進樣量為5mL，流動相為體積比為1∶1的環己烷和乙酸乙酯混合溶劑，流速4.7mL/min，流出液收集至接收管中、且收集時間為第7’40”～第15’00”，將接收管中的流出液進行吹干，吹干后所得的殘渣溶解后過濾得目標分析溶液；三、將第二步得到的目標分析溶液注入至液相色譜-質譜儀中進行測定，采用外標法進行分析得到9種營養物——高根二醇、熊果醇、麥角固醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、巖藻甾醇、豆甾醇、膽固醇、β-谷甾醇的含量。

進一步地，前述的食用植物油中9種營養物的檢測方法，其中，第三步中液相色譜-質譜儀的儀器條件為：色譜部分：色譜柱為Eclipse?XDB-C18，5μm粒徑，4.6mm×150mm；柱溫為30℃；進樣量10μL；停止時間35min；采用乙腈、甲醇和甲酸水溶液三種物料混合形成的流動相，所述的流動相按照流動相梯度表提供的參數進行梯度洗脫，

流動相梯度表

其中：A為體積濃度為0.15％的甲酸水溶液，B為乙腈，D為甲醇，表1內A、B、D按體積百分比進行配比；質譜部分：干燥氣流速6L/min；干燥氣溫度為350℃；霧化器壓力60psi；蒸發室溫度為350℃；毛細管電壓3500V；電暈針電流5μA；APCI離子源；正離子掃描；選擇離子監測模式，離子監測模式的具體參數按照待測物的保留時間及SIM參數表

待測物的保留時間及SIM參數表

進一步地，前述的食用植物油中9種營養物的檢測方法，其中，第二步中流出液吹干過程為：將接收管內的流出液轉移至全自動定量濃縮儀的濃縮管內后在35℃下氮氣吹干，吹干所得的殘渣用2.0mL乙腈溶解后由孔徑為0.22μm的濾膜過濾得目標分析溶液。

更進一步地，前述的食用植物油中9種營養物的檢測方法，其中，將接收管內的流出液轉移至全自動濃縮儀中的濃縮管中后，用乙酸乙酯蕩洗兩次接收管，并將兩次的蕩洗液合并至全自動濃縮儀中的濃縮管中，然后再進行吹干。

進一步地，前述的食用植物油中9種營養物的檢測方法，其中，第二步中使用的凝膠色譜柱為快速柱。

本發明的優點是：整個操作過程自動化程度高、易操作，且穩定性好、靈敏度高、檢測時間大大縮短。

附圖說明