[發明專利]一種從積雪草中提取羥基積雪草甙的方法

有效

• 申請號: 201410619551.6
• 申請日: 2014-11-05
• 公開（公告）號: CN104341479A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 盧照凱;謝冬養;鐘德品;周曉青;盧樺香
• 申請（專利權）人: 桂林三寶生物科技有限公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 湯凌志

技術領域

本發明涉及生物技術領域的提取方法，具體說是一種從積雪草中提取羥基積雪草甙的方法。

背景技術

積雪草，為多年生匍匐草本。別名：十八缺、崩大碗、馬蹄草、雷公根、蚶殼草、銅錢草、落得打等。生于陰濕荒地、村旁、路邊、水溝邊。莖伏地，節上生根。葉互生，葉柄長；葉片圓形或腎形，直徑2-4厘米。作為中藥材使用的積雪草，為雙子葉植物傘形科Umbelliferae積雪草Centella?asiatica(L.)Urban的干燥全草或帶根全草。含多種α-香樹脂醇型的三萜成分，其中有積雪草甙(Asiaticoside)、參枯尼甙(Thankuniside)、異參枯尼甙(Isothankuniside)、羥基積雪草甙(Madecas-soside)、玻熱模甙(Brahmoside)、破熱米甙(Brah-minoside)和破熱米酸(Brahmic?acid)，以及馬達積雪草酸(Madasiatic?acid)。積雪草具有很多藥理作用：1)中樞作用：其中所含的甙對小鼠、大鼠有鎮靜、安定作用，此作用主要是對中樞神經系統中的膽堿能系統的影響。2)對皮膚組織的作用：積雪草甙能治療皮膚潰瘍，如頑固性創傷、皮膚結核、麻風等。對小鼠，豚鼠、兔肌肉注射或皮下植入可促進皮膚生長，局部白細胞增多、結締組織盤管網增生、粘液分泌增加、毛及尾的生長加速等。曾有報告用含積雪草0.25-1％醇提取物(含積雪草酸、積雪草甙)的乳霜劑(其中尚含胚胎的或年幼的牛、豬或羊皮膚、肝、腦的水醇提取物)治療皮膚病，獲良好效果。3)美容作用：積雪草具有清熱解毒，利濕消腫、滋補、消炎、鎮定的作用。能刺激深層皮膚細胞更替。積雪草可以緊致表皮與真皮連接部分，能使皮膚變柔軟，有助于解決皮膚松弛現象，使皮膚光滑有彈性；促進真皮層中膠原蛋白形成，使纖維蛋白再生，重新連接起來，使肌膚達到緊致光滑的效果。還可幫助受損的組織愈合及緊實肌膚。既能促進表皮與真皮之間的密切連接，又能抑制脂肪細胞的增加，防止皮膚水腫、出現肥胖。4)抗菌作用：幼芽的水提取物有抗菌作用。積雪草甙能治療麻風，認為其作用為溶解細菌的蠟膜，從而被其他藥物或機體防御機能所消滅。

目前已有從積雪草中提取分離羥基積雪草甙的研究，例如公開號為CN1377649的發明專利中公開了可以制得羥基積雪草甙的方法，具體是先將積雪草總甙溶于甲醇后，進行硅膠正相色譜層析，以氯仿和甲醇的混合液為洗脫溶劑，收集其中氯仿：甲醇＝2：1比例部分的洗脫液，減壓回收洗脫液，得到白色晶體狀單一化合物羥基積雪草甙。這種方法制得的羥基積雪草甙的純度不夠理想，而且洗脫溶劑中含有氯仿，不夠環保，危害操作人員的健康。又如公開號為CN101210039的發明專利，公開了一種羥基積雪草甙化學對照品的分離制備方法，它是以重量含量30-97％的羥基積雪草甙提取物為原料，以制備型高效液相色譜為分離手段，以甲醇-水溶液為洗脫體系，獲得純度98％以上羥基積雪草甙化學對照品。該方法雖然可獲得高純度的羥基積雪草甙單品，但它是以重量含量30-97％的積雪草甙提取物為原料進行分離提純的，必須先從積雪草中提取出一定含量的積雪草甙提取物；此外，該方法所用設備制備型高效液相色譜價格較高，導致產品的生產成本偏高。

現有技術對羥基積雪草甙的提取方法，一般都會在提取后采用大孔樹脂純化作為主要的分離步驟，然而采用大孔樹脂純化方法，樹脂用前需要處理，純化需經過吸附和洗脫過程，生產周期長。在用大孔樹脂進行純化洗脫時，由于物理吸附的原因，也容易造成一部分樣品死吸附，而導致轉移率降低。另外采用大孔樹脂純化洗脫液體積較大，溶劑回收時間長，增加了生產成本，并且溶劑回收產生較多的廢液，對環保造成一定的負擔。此外由于大孔樹脂的使用，增加了引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類等有機殘留溶劑的風險，對產品的安全性造成了一定的影響。

綜上所述，研究一種簡單可行、對環境污染小的羥基積雪草甙的提取方法具有很好的現實意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種從積雪草中提取羥基積雪草甙的方法，具有工藝簡單，適合生產，時間短等優點。

本發明通過以下技術方案實現，具體包括如下步驟：

1)原料處理：將積雪草粉碎或打碎；

2)高壓提取：將處理后的原料，放入高壓罐中，加入相同重量的純凈水，加壓至4kgf/cm²，使其壓力均勻，并保持10-15min，恢復常壓，過濾，得到提取液；