[發(fā)明專利]載白藜蘆醇的氨基修飾介孔二氧化硅納米粒的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410617866.7
• 申請日: 2014-11-05
• 公開（公告）號: CN104367552B
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發(fā)明（設計）人: 李范珠;王國偉;張蓉蓉;阮葉萍;郭曼曼;徐駿軍;費偉東;韓順平;劉洋洋
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江中醫(yī)藥大學
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K31/05;A61K47/04;A61P29/00;A61P7/02;A61P35/00
• 代理公司: 杭州千克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司33246
• 代理人: 趙芳,冷紅梅

(一)技術(shù)領域

本發(fā)明涉及載白藜蘆醇的氨基修飾介孔二氧化硅納米粒的制備方法。

(二)背景技術(shù)

白藜蘆醇(Resveratrol，RES)為蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.干燥根莖及根中提取出來的一種含有芪類結(jié)構(gòu)的非黃酮類多酚化合物^[1]。研究證明，RES不僅有抗炎、抗血栓等功效^[2]，而且RES通過抗氧化、抗突變、抑制環(huán)加氧酶和氫過氧化物酶的活性，抑制癌細胞的生長和增殖、誘導癌細胞的分化和凋亡，被喻為繼“紫杉醇”之后又一新的綠色抗癌物質(zhì)。但是，由于其理化性質(zhì)不穩(wěn)定、極難溶于水、半衰期短等特性，致口服制劑的生物利用度較低、血藥濃度不穩(wěn)定，嚴重限制其臨床應用。

納米粒載體作為一種新型藥物傳遞系統(tǒng)，將藥物包載于納米粒中，一方面可以提高藥物穩(wěn)定性，具有緩控釋特性，另一方面可以增加生物膜透過性、改變藥物體內(nèi)分布、提高生物利用度等。其中，介孔二氧化硅(Mesoporous Silica Nanoparticles，MSN)作為一種新型的介孔材料，其巨大的比表面積和比孔容可有效的提高載藥量，介孔結(jié)構(gòu)和孔徑調(diào)節(jié)藥物釋放特性，豐富的表面硅羥基極易修飾或改性，并且MSN具有良好的生物相容性，使其在藥物載體領域具有優(yōu)良的研究前景。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種氨基改性的介孔二氧化硅(Amino-modified Mesoporous Silica Particles，NH₂-MSN)為載體材料，制備新型口服氨基改性介孔二氧化硅載白藜蘆醇納米粒(NH₂-MSN-RES)的方法，為RES納米制劑的研究提供參考。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

載白藜蘆醇的氨基修飾介孔二氧化硅納米粒的制備方法，所述方法包括：(1)稱取氨基修飾介孔二氧化硅納米粒(H₂N-MSN)，分散到白藜蘆醇(RES)的飽和乙醇溶液中，氨基修飾介孔二氧化硅納米粒與白藜蘆醇飽和乙醇溶液用量之比為100mg：20～25mL，常溫下避光攪拌，每隔20～30min超聲處理3～5min，攪拌2～3h使H₂N-MSN充分吸附RES飽和乙醇溶液，然后15000～20000r·min^-1離心20～30min，將離心得到的白色固體35～45℃減壓干燥，得到載藥粉末；(2)重復步驟(1)操作8～9次，即得所述載白藜蘆醇的氨基修飾介孔二氧化硅納米粒。本發(fā)明采用反復飽和溶液吸附法來制備H₂N-MSN-RES，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)，隨著吸附次數(shù)的增加，H₂N-MSN載入RES的量不斷增加，吸附8次之后，載入藥量基本不變，因此，本發(fā)明確定了反復飽和溶液吸附法來制備H₂N-MSN-RES的吸附次數(shù)為8～9次。

優(yōu)選的，所述氨基修飾介孔二氧化硅納米粒按如下方法制備得到：將CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)溶解于超純水中，加入適量2M NaOH溶液，80～85℃恒溫攪拌2～3h，然后快速加入適量TEOS(正硅酸乙酯)，30min后緩慢恒速滴入適量APTES(3-氨丙基三乙氧基硅烷)，控制5min內(nèi)滴畢，恒溫繼續(xù)反應2～3h，反應結(jié)束后靜置熟化24h，15000～20000r·min^-1離心20～30min得到白色固體，將離心得到的白色固體分散于濃度為10mg·mL^-1的NH₄NO₃乙醇溶液中80℃回流4～5h，經(jīng)過6次反復操作去除CTAB后，再經(jīng)離心、真空干燥，得到白色粉末，即為所述氨基修飾介孔二氧化硅納米粒。本發(fā)明在經(jīng)典Stober法制備MSN基礎上，改良了經(jīng)典Stober法，進行一步合成H₂N-MSN，制得H₂N-MSN氨基成功修飾，呈圓整球形，分布均一，粒徑為98.4±2.8nm，Zeta電位13.2±1.8mv，在0～20ug·mL^-1范圍內(nèi)，對Caco-2細胞無明顯的毒性。

具體的，所述CTAB：水：2M NaOH溶液：TEOS：APTES用量之比為1.0g：400～500mL：3～5mL：2～4mL：1～3mL。

本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：本發(fā)明改良的經(jīng)典Stober法成功合成了NH₂-MSN，通過反復飽和溶液吸附法能夠有效提高載藥量，制備得到的NH₂-MSN-RES提高了RES的生物利用度，具有較好市場前景。