[發(fā)明專利]一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410610278.0
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104359999A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉鴻;顧文博;謝雯燕;陸怡峰;王磊君
• 申請（專利權(quán)）人: 上海煙草集團有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，通過混合溶劑進行萃取，再采用氣相色譜三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法測定煙草中煙草特有N-亞硝胺的含量，具體包括以下步驟：

1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：配制內(nèi)標(biāo)溶液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液；

2)樣品前處理：稱取煙草粉末樣品，加入含有步驟1)中所述內(nèi)標(biāo)溶液的混合溶劑，超聲萃取后離心，取上清液，待測；

3)樣品定性檢測：分別將步驟1)配制的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和步驟2)中待測液進行GC-QQQ-MS/MS檢測，比較保留時間進行定性，確定待測液中4種煙草特有N-亞硝胺成分；

4)樣品定量檢測：分別將步驟1)配制的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和步驟2)中待測液進行GC-QQQ-MS/MS檢測，采用內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法進行定量，獲得待測液中4種煙草特有N-亞硝胺成分的濃度含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，所述煙草特有N-亞硝胺包括有N-亞硝基去甲基煙堿、4-(甲基亞硝基氨基)-l-(3-比啶基)-1-丁酮、N-亞硝基假木賊堿和N-亞硝基新煙草堿。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，所述步驟1)為：

A、分別稱取NAB、NAT、NNN、NNK的標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇定容，配成混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液；

B、分別稱取d4-NNN、d4-NAT、d4-NAB、d4-NNK，加入甲醇定容，配成內(nèi)標(biāo)溶液；

C、分別移取不同體積的步驟A中混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，再分別加入一定體積的步驟B中內(nèi)標(biāo)溶液，用甲醇定容配制為一系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述混合溶劑為有機溶劑和氫氧化鈉的混合溶劑；所述有機溶劑選自二氯甲烷和甲醇中的任意一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述有機溶劑為二氯甲烷。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述氫氧化鈉的質(zhì)量百分比濃度為5-15％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述超聲萃取時間為27-33分鐘。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述煙草粉末樣品在超聲萃取后加入無水硫酸鈉除水。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，步驟2)中，所述離心條件為：離心轉(zhuǎn)速：2700-3300rpm；離心時間為2-4分鐘。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種煙草中煙草特有N-亞硝胺的測定方法，其特征在于，所述步驟3)或4)中，GC-QQQ-MS/MS檢測條件為：

氣相色譜條件為：色譜柱：DB-35MS?UI石英毛細管色譜柱30m×0.25μm×0.25μm；進樣口溫度：290℃；進樣量：1μl；載氣：高純氦氣，載氣純度≥99.999％；載氣流速：1.2ml/min，恒流模式；不分流進樣；升溫程序：初始溫度50℃保持1min，以30℃/min的速率升至200℃，再以5℃/min的速率升至230℃，再以30℃/min的速率升至280℃，保持3min，總運行時間為15min；

質(zhì)譜條件為：傳輸線溫度：290℃；離子源溫度:250℃；Q2碰撞氣：氮氣，1mL/min；燈絲電流：225μA；溶劑延遲：5min；電離方式：PCI正電壓化學(xué)電離模式；電離能：210eV；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測。