[發明專利]一株植物乳桿菌及其在苜蓿青貯中的應用

有效

• 申請號: 201410610004.1
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104336416A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 王雁萍;楊富裕;李東霞;焦湞
• 申請（專利權）人: 鄭州大學;中國農業大學
• 主分類號: A23K3/02
• 分類號: A23K3/02;C12N1/20;C12R1/25
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一株植物乳桿菌及其在苜蓿青貯中的應用。

背景技術

苜蓿(Medicago?sativa)屬于多年生豆科牧草，蛋白含量高，營養成分全面，富含維生素和微量元素，抗寒耐旱，是一種優質、高產、適應性強、適合大面積種植的經濟飼草。在苜蓿生產實踐中，傳統的干草制備法在濕熱的雨季受到極大限制，而青貯則是解決此問題的好方法。青貯是通過乳酸菌以可溶性糖為主要基質發酵產生乳酸等有機酸，降低青貯飼料的pH值，抑制其它有害微生物(如酪酸菌)的活性。與燕麥、青貯稻與青貯玉米等材料相比，苜蓿的可溶性糖含量低，僅為3.07％～4.56％，而緩沖能值高達414～580mE/kgDM(每千克干物質中毫克當量數)，致使自然青貯發酵進程慢，穩定性差，并伴有過多的呼吸、發熱和滲液等情況，因而青貯難度較大，自然青貯十分困難。為促進苜蓿青貯發酵，添加糖蜜、酸類、纖維素酶及乳酸菌等青貯添加劑是當前廣泛使用的一些方法。在苜蓿青貯中乳酸菌通常與糖蜜或纖維素酶等聯合添加才能達到理想的青貯效果，這無疑增加了青貯的成本和操作的復雜性，因此篩選適合苜蓿材料和青貯特點的苜蓿青貯專用優良乳酸菌尤為重要。

發明內容

本發明的目的是提供植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208CGMCC?NO.8990或其發酵產物或其菌懸液或其培養液在作為苜蓿青貯添加劑或制備苜蓿青貯添加劑中的應用。

上述植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208CGMCC?NO.8990或其發酵產物或其菌懸液或其培養液在制備苜蓿青貯飼料中的應用也是本發明保護的范圍。

上述植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208CGMCC?NO.8990或其發酵產物或其菌懸液或其培養液在降低苜蓿青貯飼料pH值、降低苜蓿青貯飼料纖維含量、提高苜蓿青貯飼料粗脂肪和/或提高苜蓿青貯飼料粗蛋白含量中的應用也是本發明保護的范圍。

上述應用中，所述苜蓿為苜蓿WL343或苜蓿標桿。

所述纖維含量為中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維總量或中性洗滌纖維含量。

本發明的另一個目的是提供一種制備苜蓿青貯的方法，包括如下步驟：將植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208CGMCC?NO.8990添加到苜蓿中，青貯，得到苜蓿青貯飼料。

上述方法中，所述植物乳桿菌和所述苜蓿的配比為10⁷-10⁸cfu/100g。

上述方法中，所述植物乳桿菌是以植物乳桿菌培養液或菌懸液加入。

上述方法中，所述青貯的條件為青貯袋抽真空厭氧25℃；

所述植物乳桿菌菌懸液為將植物乳桿菌培養液收集菌體懸浮水中得到的菌懸液；所述植物乳桿菌培養液的培養條件為30℃培養48h，培養采用的培養基為MRS液體培養基。

本發明另一個目的是提供一株植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208。

本發明提供的植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?ZZU?208，其保藏號為CGMCC?NO.8990。

乳酸菌ZZU?208于2014年4月2日，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，保藏編號為CGMCC?NO.8990，分類命名為植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)。

本發明的實驗證明了，從玉米青貯飼料中分離純化到的乳酸菌ZZU?208能夠在較低可溶性糖的環境下生長并產酸，對致病菌具有較好的抑菌活性。在苜蓿青貯中能夠有效降低pH，降低纖維含量(中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維總量)，提高粗脂肪和粗蛋白含量，在作為苜蓿青貯添加劑方面具有潛在的應用價值。

附圖說明

圖1為recA基因的PCR擴增產物電泳圖。

具體實施方式

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。

實施例1、植物乳桿菌的獲得

1、分離純化

從玉米(品種：鄭超甜2號)青貯飼料中分離純化到乳酸菌ZZU?208，為同型發酵乳酸菌，具體如下：