[發明專利]總狀蕨藻中(22反式)-3β-羥基-膽甾-5,22-二烯-24-酮的提取方法

有效

• 申請號: 201410608591.0
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104478981A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 毛水春;章海燕;郭躍偉;劉定權
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00;A61K31/575;A61P25/28;A61P25/00
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 施秀瑾

1.?一種從總狀蕨藻中提取(22反式)-3β-羥基-膽甾-5,22-二烯-24-酮的方法，其特征在于按下列步驟進行：

1）制備提取物浸膏

將冷凍的總狀蕨藻常溫下解凍，用乙醇按常規滲漉提取三次，每次24小時，得提取液，將提取液減壓濃縮回收乙醇，得粗浸膏；

2）分離純化

(1)?將上述粗浸膏分散于水中成混懸液，將混懸液依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分別萃取三次，所得萃取液減壓濃縮分別得到石油醚提取浸膏、乙酸乙酯提取浸膏和正丁醇提取浸膏；

(2)?將乙酸乙酯浸膏進行硅膠柱層析，以石油醚/丙酮梯度洗脫，收集的分離組分利用硅膠薄層層析檢測，成份相同的分離組分合并、濃縮后得到A、B、C、D、E五個分離組分；其中組分C即石油醚/丙酮體積比8:2和7:3洗脫部分經Sephadex?LH-20凝膠柱層析以二氯甲烷/甲醇洗脫，硅膠柱層析以石油醚/二氯甲烷梯度體積比為7:3洗脫，反相高效液相色譜法?C₁₈柱?(10?μm，250×10?mm)，以甲醇:水=83:17（V/V）作為流動相梯度洗脫，流速為3mL/min，210nm?波長下檢測，得到化合物(22反式)-3β-羥基-膽甾-5,22-二烯-24-酮。

2.?根據權利要求1所述的制備方法，其特征是，在制備提取物浸膏步驟中，所述乙醇為95%乙醇。

3.?根據權利要求1所述的制備方法，其特征是，在分離純化步驟中，所述Sephadex?LH-20凝膠柱層析中用的二氯甲烷/甲醇洗脫濃度為體積比1:1。