[發明專利]一種文冠果的組織培養快繁方法

無效

• 申請號: 201410607808.6
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104285816A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 楊業容
• 申請（專利權）人: 楊業容
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 邱振泉

1.一種文冠果的組織培養快繁方法，其特征在于包括以下工藝步驟：

（1）外植體的處理：選擇文冠果成熟種胚為外植體，置于60～80℃溫水中自然晾卻至室溫浸泡5～8h,然后用含有0.01～0.05%吐溫-20的0.1～0.5%升汞溶液消毒2～10min,無菌水沖洗3～5次，剝去種皮后置于75～80%乙醇溶液中浸泡20～60s，無菌水沖洗3～5次，再用含有0.01～0.05%吐溫-20的0.1～0.5%升汞溶液消毒2～5min，無菌水沖洗3～5次后備用；

（2）愈傷組織誘導：將消毒好的種胚切成大約3～5mm³的組織塊，并接種到誘導培養基上進行愈傷組織誘導培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養20～30天，然后置于每天光照10～11小時，光照強度為1500～2500lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養直至形成愈傷組織；

（3）繼代培養：愈傷組織生長至15～25天后，將長勢良好的愈傷組織轉接至繼代培養基中進行繼代培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養3～7天，然后置于每天光照12～15小時，光照強度為2000～3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，25～30天繼代一次；

（4）不定芽誘導：將培養至30～40天的長勢良好的愈傷組織轉接至芽誘導培養基中進行不定芽誘導培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養10～15天，然后置于每天光照12～15小時，光照強度為2000～3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養直至形成不定芽；

（5）生根培養：將分化出的芽長至3～5cm接種至生根培養基中進行根誘導，接種后先在25～28℃條件下全暗培養5～7天，然后置于每天光照12～15小時，光照強度為2000～3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養直至長出根；

（6）試管苗移栽：將長至8～10cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗5～7天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，盡量不傷害根部，栽入由黃沙土和火碳泥（1：1）混合成的基質中并定植于大田中。

2.根據權利要求1所述的一種文冠果的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（2）所述的誘導培養基為：MS+?1.0～2.0mg/L2,4-D+2.5%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值為5.4～5.8。

3.根據權利要求1所述的一種文冠果的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（3）所述的繼代培養基為：MS+0.1～1.0mg/L?2,4-D+0.5～2.0mg/L?NAA+0.5～1.0mg/L?6-BA+2.5%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值為5.4～5.8。

4.根據權利要求1所述的一種文冠果的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（4）所述的芽誘導培養基為：MS+0.1～1.0mg/L?NAA+1.0～3.0mg/L?6-BA+2.5%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值為5.4～5.8。

5.根據權利要求1所述的一種文冠果的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（5）所述的生根培養基為：1/2MS+1～3mg/L?IBA+0.1～0.5mg/L?NAA+2.0%～2.5%蔗糖+0.4%～0.6%瓊脂+0.05%～0.1%活性炭，pH值為5.4～5.8。