[發明專利]一種黃山欒樹的組培方法

有效

• 申請號: 201410607050.6
• 申請日: 2014-10-31
• 公開（公告）號: CN104273038A
• 公開（公告）日: 2015-01-14
• 發明（設計）人: 陳建中;孫慶俊;張海洋;楊帆
• 申請（專利權）人: 陳建中
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 袁彩君

技術領域

本發明涉及一種植物組織培養方法，具體涉及一種黃山欒樹的組培方法，屬于生物技術領域。

背景技術

黃山欒樹(Koelreuteria?integrifolia?Merr.)為無患子科欒樹屬落葉喬木，其樹形端正，具有春觀紅葉、夏看黃花、秋賞“燈籠”之優點，加之生長迅速和抗煙塵等特點，現已成為比較理想的綠化、美化和水土保持林樹種，并迅速發展成為長江流域替代楊樹等一般樹種的風景林樹種，是我國城市綠化十大落葉樹種之一。

黃山欒樹的繁殖可以用播種、分蘗和扦插等方法進行，但播種法容易出現不發芽或發芽率低的問題，分蘗法的繁殖系數低，扦插育苗則容易受季節影響。通過黃山欒樹組織培養，不僅可以擴大其繁殖系數，實現規模化繁殖，而且可以在保存其原有優良性狀的基礎上，實現黃山欒樹種苗的快速繁殖和壯苗生產。

植物組培工廠化育苗中，如何減少培養基費用尤其植物生長調節物質費用通常是降低植物組培苗成本的關鍵，如果能通過培養基改造，既降低培養基成本，又不影響試管苗的增殖和生長，則可以顯著提高工廠化育苗的經濟效益。本發明通過在黃山欒樹培養基中添加黃山欒樹葉提取液，由于提取液中具有促進黃山欒樹組培苗增殖、生長和生根的有效化學成份，減少了基本培養基用量和植物生長調節物質費用，降低了黃山欒樹組培苗生產成本，提高了經濟效益。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種黃山欒樹的組培方法，以建立一個低廉高效的黃山欒樹組培快繁技術體系。

本發明解決所述技術問題的方案是：一種黃山欒樹的組培方法，包括如下步驟，

(1)黃山欒樹葉提取液的置備

將新鮮黃山欒樹葉切割成小塊后在蒸餾水中煮沸，冷卻、過濾后配成質量濃度為10％的提取液；

(2)初代誘導培養

初代誘導培養基為3/4WPM+6-BA?0.5～1.0mg/L+NAA?0.05～0.08mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是質量濃度，由步驟(1)中質量濃度為10％的提取液稀釋而成；

從健壯黃山欒樹植株上獲取黃山欒樹莖段外植體，外植體經常規消毒后接種于初代誘導培養基上；培養溫度為25±2℃，光照強度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

(3)繼代增殖培養

繼代增殖培養基為：3/4WPM+6-BA?0.3～0.8mg/L+NAA?0.03～0.05mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％提取液指的是質量濃度，由步驟(1)中質量濃度為10％的提取液稀釋而成；

將初代誘導培養得到的黃山欒樹無菌苗的莖段或莖尖無菌接種于繼代增殖培養基上進行培養，培養溫度為25±2℃，光照強度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

(4)組培苗生根

生根培養基為：2/5WPM+IBA?0.1～0.3mg/L+1～2％提取液+白糖20g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，1～2％提取液指的是質量濃度，由步驟(1)中質量濃度為10％的提取液稀釋而成；

將增殖培養獲得的黃山欒樹無菌叢生苗切成單株接種于生根培養基上，培養溫度為25±2℃，光照強度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

(5)試管苗的馴化和移栽

將黃山欒樹生根試管苗從培養室移至塑料大棚放置5～7d后，去瓶蓋煉苗3～5d，然后從瓶內取出黃山欒樹幼苗，用水輕輕洗凈培養基，將待栽的黃山欒樹幼苗根部用0.1％多菌靈處理10s后，將幼苗移栽入穴盤中的栽培基質內，覆膜保濕5～7d，其間每天通風透氣10～15min兩次，視光照強度適當加蓋遮陽網，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，噴施1000倍液的甲基托布津，此后進行正常的栽培管理。

由于本方法在初代培養、繼代培養和生根培養的培養基中添加了黃山欒樹葉提取液，提取液中的有效化學成份有利于黃山欒樹組培苗的增殖、生長和生根，降低了基本培養基和植物生長調節物質用量，該方法與常規黃山欒樹組培方法相比，可縮短周期時長15％，節約成本20％，適用于工廠化生產。

具體實施方式

實施例1

一種黃山欒樹的組培方法，其特征在于：包括如下步驟，

(1)黃山欒樹葉提取液的置備