[發明專利]一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法

有效

• 申請號: 201410604468.1
• 申請日: 2014-10-31
• 公開（公告）號: CN104399092A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 沈明武;胡勇;李靜超;韋平;史向陽
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: A61K49/18
• 分類號: A61K49/18;A61K49/14
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

1.一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，包括：

(1)將三價鐵鹽溶解于超純水中，氮氣鼓吹后加入亞硫酸鈉溶液，反應30～40分鐘；然后依次加入超支化聚乙烯亞胺PEI水溶液和NH₃·H₂O，60～70℃下恒溫攪拌反應30～40分鐘；然后在室溫下反應1.5～3小時；反應結束后，將產物磁分離洗滌純化，即得PEI包裹的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒USPIO/PEI.NH₂；

(2)將步驟(1)中制備的USPIO/PEI.NH₂納米顆粒用DMSO洗滌后，重新分散于DMSO中；再將DMSO溶解的FI加入到USPIO/PEI.NH₂的DMSO溶液中，攪拌反應1～2天，磁分離洗滌并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂-FI納米顆粒；

(3)將6-(馬來酰亞胺基)己酸琥珀酰亞胺酯6-M與COOH-PEG-NH₂混合于DMSO溶液中，攪拌反應10～12小時，得到COOH-PEG-6-M；然后再將充分溶解于DMSO中的端基為巰基的RGD?SH-RGD逐滴加入到COOH-PEG-6-M的DMSO溶液中，攪拌反應1～2天，透析，真空冷凍干燥，即得到COOH-PEG-RGD；

(4)將步驟(3)中制備的COOH-PEG-RGD與EDC、NHS混合溶解于DMSO后，攪拌活化2～4h；將步驟(2)中制備的USPIO/PEI.NH₂-FI納米顆粒用DMSO洗滌后，重新分散于DMSO中，然后加入活化的COOH-PEG-RGD溶液，攪拌反應2～4天，磁分離洗滌并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂-FI-PEG-RGD納米顆粒；

(5)向步驟(4)中制備的USPIO/PEI.NH₂-FI-PEG-RGD納米顆粒水溶液中加入三乙胺，并攪拌20～40分鐘；然后加入乙酸酐，繼續攪拌反應20～30小時，磁分離洗滌并分散于超純水中，即得最終產物USPIO/PEI.NHAc-FI-PEG-RGD。

2.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的三價鐵鹽為FeCl₃·6H₂O；三價鐵鹽、超純水、NH₃·H₂O的配比為1.2～1.4g:20～25mL:2～3mL，三價鹽、亞硫酸鈉、超支化聚乙烯亞胺PEI的質量比為1.2～1.4:0.20～0.25:0.50～0.53。

3.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的NH₃·H₂O質量百分比濃度為25～28％。

4.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的超支聚乙化烯亞胺PEI的分子量為25000。

5.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中FI與USPIO/PEI.NH₂表面氨基的摩爾比為1:39～40。

6.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中RGD:6-M:NH₂-PEG-COOH的摩爾比為1:1～1.2:1～1.2；

NH₂-PEG-COOH的分子量為2000。

7.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中透析為用截留分子量1000的透析袋透析2-4天。

8.根據權利要求1所述的一種RGD修飾的超小型超順磁氧化鐵納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中的COOH-PEG-RGD與EDC、NHS的摩爾比為1:8～10:8～10。