[發明專利]一種異香豆素類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201410603735.3
• 申請日: 2014-10-30
• 公開（公告）號: CN104387402A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 尚善齋;繆明明;雷萍;趙偉;楊光宇;陳永寬;湯建國;袁大林;鄭緒東;孫志勇
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A01N43/90;A01P1/00
• 代理公司: 北京權泰知識產權代理事務所(普通合伙) 11460
• 代理人: 任永利

技術領域

本發明屬于植物化學技術領域，具體涉及一種源于煙草的異香豆素類化合物及其制備方法與應用。

背景技術

煙草是世界上化學成分最為復雜的植物之一，次生代謝產物非常豐富，據1982年Dube和Green等報道，煙草中已鑒定出的化學成分就超過2549種，到2008年，Rodgman和perfetti的報道稱，煙草、煙草代用品以及卷煙煙氣中發現的化合物總數大約為8700種。目前，人們從煙草中鑒定出來的單體化學物質就超過3000多種，而且還有許多成分尚未鑒定出來。煙草除主要用于卷煙抽吸用途外，還可從中提取多種有利用價值的化學成分，從中發現有開發利用價值的先導性化合物。

異香豆素是一些天然產物的基本結構，廣泛分布于自然界中，種類繁多，特別是最近發現其衍生物具有抗病毒、抗菌、消炎、抗癌、抑制蛋白酶和除草等生理和生物活性。同時已有研究證實，其藥理作用與化學結構密切相關，為了研究這類化合物的構效關系，可進一步研究和開發更多的異香豆素類化合物，從中尋找有效的先導化合物和活性基團。本發明從煙草中分離得到了一種具有抗煙草花葉病毒活性的異香豆素類化合物，該化合物至今尚未見到相關報道。

發明內容

本發明的第一方面在于提供一種新型的異香豆素類化合物，其分子式為C₁₅H₁₆O₄，經過分析化學鑒定，其具有下述結構：

根據有機化合物的系統命名法，該化合物被命名為2-(羥甲基)-8,8-二甲基-9,10-二氫吡喃[4,3-f]苯并吡喃-4(8H)-酮。

該化合物為白色固體，本發明人將其命名為“煙草異香豆乙素”，并將其英文名稱命名為：tabaisocoumarin-B。

本發明的第二方面提供了上述第一方面所述的異香豆素類化合物的制備方法，該方法包括如下步驟：

a.制備煙草提取物浸膏：以煙草全株為原料，將其粉碎并用第一溶劑浸泡并提取所述煙草2～4次，每次24h～48h，將提取液合并、過濾并濃縮后得到所述煙草提取物浸膏；其中所述第一溶劑是選自乙醇、甲醇或丙酮的有機溶劑與水的混合物，其中有機溶劑占該第一溶劑的75wt％～100wt％，且第一溶劑：煙草＝2～4:1，重量比；

b.硅膠柱層析：將上述煙草提取物浸膏用選自純甲醇、純乙醇或純丙酮的第二溶劑溶解后與為煙草提取物浸膏的0.8～1.5重量倍的60～120目硅膠拌樣，將拌樣后的混合物再與為煙草提取物浸膏的2～5重量倍的120～300目硅膠混合后干法裝柱，然后用體積比依次為20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1的一系列氯仿-丙酮溶液進行梯度洗脫，收集其中用體積比為10:1的氯仿-丙酮溶液洗脫時得到的洗脫液，稱為第一洗脫液；

c.中壓液相色譜柱層析：將所述第一洗脫液用1.0～2.0重量倍的甲醇稀釋后與0.8-1.5重量倍的中壓液相色譜柱反向柱填料混合后裝柱，用甲醇體積濃度依次為40％、55％、70％、85％、100％的甲醇水溶液進行梯度洗脫，保留其中用甲醇體積濃度為55％的甲醇水溶液洗脫時得到的洗脫液，稱為第二洗脫液；

d.高壓液相色譜分離：將上述第二洗脫液通入高壓液相色譜進行分離純化，該高壓液相色譜采用21.2mm×250mm，5μm的C₁₈色譜柱，流動相為46wt％的甲醇水溶液，流動相流速為12mL/min，紫外檢測器檢測波長為322nm，第二洗脫液液每次進樣120μL～200μL，收集每次進樣后色譜峰保留時間為38.0min時所對應的洗脫液，稱為第三洗脫液，將該第三洗脫液脫除溶劑后即得所述異香豆素類化合物。

前述中壓液相色譜是指使用時壓力在0.5-2Mpa的反相制備色譜，所述高壓是指使用時壓力在5-15Mpa的反相制備色譜。

本發明的第三方面提供了第一方面所述的異香豆素類化合物在制備抗煙草花葉病藥物中的應用。

附圖說明

圖1為本發明的新型異香豆素類化合物的核磁共振碳譜。

圖2為本發明的新型異香豆素類化合物的核磁共振氫譜。

圖3為本發明的新型異香豆素按照天然產物化學中的經典編號方法的碳原子編號圖，在下面結合該產物的各種譜圖來鑒定該產物的結構過程中，使用了該經典編號方法。

圖4為已知化合物6,8-二羥基-3-羥基甲基-異香豆素的結構。

圖5為本發明的新型異香豆素類化合物的主要¹H-¹H?COSY和HMBC相關圖示。