[發明專利]產生γ-氨基丁酸的方法

在審

• 申請號: 201410601958.6
• 申請日: 2009-02-20
• 公開（公告）號: CN104357431A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: O·策爾德爾;W·K·鄭;C·克洛普羅格;A·赫羅爾德;H·施羅德
• 申請（專利權）人: 巴斯夫歐洲公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/77;C12N1/21;C12R1/15
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 凌立;黃革生

1.谷氨酸脫羧酶，其包含SEQ?ID?NO:2的Thr94至Leu336的氨基酸序列，或者與其具有至少90％同一性的序列。

2.權利要求1的谷氨酸脫羧酶，其N端和/或C端補充了來自馬鈴薯的谷氨酸脫羧酶的對應末端氨基酸序列。

3.權利要求1的谷氨酸脫羧酶，其N端和/或/或C端補充了的不同于馬鈴薯的第二植物的谷氨酸脫羧酶的對應末端氨基酸序列。

4.權利要求3的酶，其中所述第二植物是番茄。

5.權利要求4的酶，其中所述谷氨酸脫羧酶包含SEQ?ID?NO:2的氨基酸序列或者與其具有至少90％同一性的序列。

6.前述權利要求中任一項的方法，其中具有谷氨酸脫羧酶活性的酶由包含選自下列的編碼序列的核酸序列編碼：

根據SEQ?ID?NO:1的472至1200位，或者根據SEQ?ID?NO:1的193至1605位。

7.核酸序列，其包含權利要求1-6中任一項的谷氨酸脫羧酶的編碼序列。

8.表達盒，其包含至少一個權利要求7的核酸序列，所述序列有效連接至少一個調節核酸序列。

9.重組載體，其包含至少一個權利要求8的表達盒。

10.原核或真核宿主，其轉化了至少一個權利要求9的載體。

11.權利要求10的宿主，其選自重組棒桿菌細菌，尤其選自重組棒桿菌屬細菌。

12.權利要求11的宿主，其為重組谷氨酸棒桿菌。

13.權利要求10-12中任一項的重組宿主，其進一步包含選自以下的至少一個基因失調：

i)擴增異檸檬酸脫氫酶；

ii)擴增谷氨酸脫氫酶；

iii)擴增磷酸烯醇丙酮酸羧化酶；

iv)通過點突變和擴增丙酮酸羧化酶釋放反饋抑制；

v)減弱2-酮戊二酸脫氫酶；

vi)減弱異檸檬酸裂合酶；

vii)減弱磷酸烯醇丙酮酸羧激酶；

viii)減弱谷氨酰胺合成酶；和

ix)減弱谷氨酸輸出物。