[發(fā)明專利]銅綠假單胞菌多重耐藥基因液態(tài)芯片檢測試劑盒

有效

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• 申請日: 2014-10-30
• 公開（公告）號: CN104313166A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梁冰;孫青菊;黃寧
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍濟(jì)南軍區(qū)第四〇一醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種銅綠假單胞菌多重耐藥基因液態(tài)芯片檢測試劑盒，屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

2010年，隨著“超級細(xì)菌”這一名詞頻繁地見諸報端，細(xì)菌多重耐藥、抗生素的合理使用重返人們視線。超級細(xì)菌其實并非新事物，它不是一個細(xì)菌的名稱，而是一類細(xì)菌的名稱，這一類細(xì)菌的共性是對幾乎所有的抗生素都有強(qiáng)勁的耐藥性，它們一直存在并且隨著人類濫用抗生素而進(jìn)化出強(qiáng)大耐藥性。細(xì)菌耐藥性，尤其是多重耐藥性(multidrugresistance，MDR)已經(jīng)成為非常嚴(yán)重的醫(yī)療問題及社會問題。

細(xì)菌耐藥機(jī)理十分復(fù)雜，在抗生素的壓力選擇下，臨床細(xì)菌耐藥狀況的日益惡化。細(xì)菌耐藥性的檢測與監(jiān)測對于正確的目標(biāo)性抗感染治療以及監(jiān)測細(xì)菌耐藥性變遷和耐藥菌感染的流行病學(xué)調(diào)查，制定防控細(xì)菌耐藥性增加的措施至關(guān)重要。然而，目前臨床實驗室多采用耐藥表型的檢測方法，其檢測周期長時效性差、檢測通量低、影響因素多是最主要的問題，不能滿足目前臨床抗感染治療和醫(yī)院感染控制的要求。

液態(tài)芯片(又稱流式熒光技術(shù)、液相芯片、懸浮陣列等)是在后基因組時代發(fā)展起來的新一代標(biāo)準(zhǔn)化開放式高通量技術(shù)平臺，它有機(jī)地整合了編碼微球、激光技術(shù)、應(yīng)用流體學(xué)、最新的高速數(shù)字信號處理器和計算機(jī)運算法則，具有高通量、高速度、低成本、靈敏度高、重復(fù)性好、線性范圍廣等優(yōu)點，可廣泛應(yīng)用于免疫分析、核酸研究、酶學(xué)分析、受體和配體識別分析等研究，也是是目前唯一得到權(quán)威機(jī)構(gòu)和醫(yī)學(xué)界共同認(rèn)可用于臨床診斷的生物芯片平臺。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：利用液態(tài)芯片技術(shù)，提供一種銅綠假單胞菌多重耐藥基因液態(tài)芯片檢測試劑盒。

本發(fā)明所述銅綠假單胞菌8個多重耐藥基因包括OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

銅綠假單胞菌多重耐藥基因液態(tài)芯片檢測試劑盒，所述銅綠假單胞菌多重耐藥基因包括OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP共8個耐藥基因，其特征在于，試劑盒包括核酸擴(kuò)增組份和雜交組份；

核酸擴(kuò)增組份具體包括下列成分：

預(yù)混液：含有dATP、dTTP、dCTP、dGTP、MgCl2的Tris-HCl緩沖液；

引物混合液：8對耐藥基因的引物混合液；

聚合酶：含甘油和穩(wěn)定劑配方的DNA聚合酶；陽性質(zhì)控品：含OPRD2、TEM、OXAl0、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP基因的陽性菌株混合液；

陰性質(zhì)控品：滅菌水；

雜交組份具體包括下列成分：

微球雜交液：為8種包被探針的微球混合懸液；

鏈霉親和素-藻紅蛋白：含鏈霉親和素-藻紅蛋白的Tris-HCl和EDTA緩沖液；

上述8個耐藥基因的引物序列為：

上述8個耐藥基因的探針序列為：

耐藥基因探針序列