[發(fā)明專利]一種反芻動(dòng)物內(nèi)源氮排泄量的測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410596579.2
• 申請(qǐng)日: 2014-10-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105572333A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-05-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周傳社;譚支良;湯少勛;陳亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所
• 主分類號(hào): G01N33/483
• 分類號(hào): G01N33/483
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及反芻動(dòng)物內(nèi)源氮排泄量測(cè)定領(lǐng)域，更具體涉及一種測(cè)定反芻動(dòng)物消化道不同 部位內(nèi)源氮排泄量的方法，以便于準(zhǔn)確定量測(cè)定反芻動(dòng)物消化道不同部位內(nèi)源氮排泄量，降 低測(cè)定成本；并通過(guò)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段，降低反芻動(dòng)物氮排放。

背景技術(shù)

動(dòng)物即使在采食無(wú)氮日糧時(shí)，其糞便和尿液中仍還有一定氮素，此類氮即為內(nèi)源氮，是 動(dòng)物生理代謝過(guò)程中不可避免的。糞中內(nèi)源氮主要來(lái)源于動(dòng)物體內(nèi)酶、腸脫落細(xì)胞、血漿清 蛋白、氨基酸等；而尿中內(nèi)源氮主要來(lái)源于動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氮代謝產(chǎn)物如尿素和尿酸等。目前， 關(guān)于動(dòng)物消化道內(nèi)源氮排泄量的測(cè)定方法，主要采用無(wú)氮日糧法、完全可消化蛋白源或靜脈 灌注平衡氨基酸法、肽營(yíng)養(yǎng)超濾技術(shù)、回歸分析法、高精氨酸法、氨基酸庫(kù)法和同位素標(biāo)記 內(nèi)(外)源氮法，這些測(cè)定方法在理論、技術(shù)或應(yīng)用等方面均或多或少存在某些不足。無(wú)氮 日糧法是動(dòng)物處于非正常生理?xiàng)l件下測(cè)定內(nèi)源氮最簡(jiǎn)單的經(jīng)典方法，但由于動(dòng)物處在非正常 的生理狀態(tài)，缺乏日糧蛋白質(zhì)或肽對(duì)消化酶的刺激，因此低估內(nèi)源氮排泄量；完全可消化蛋 白源或靜脈灌注平衡氨基酸法，該方法的前提條件是酪氨酸或平衡氨基酸在消化道內(nèi)被完全 吸收，而事實(shí)上日糧粗纖維水平和抗?fàn)I養(yǎng)因子等含量均影響內(nèi)源氮的排泄與吸收；肽營(yíng)養(yǎng)超 濾技術(shù)的不足之處在于超濾技術(shù)本身的技術(shù)難度以及沒(méi)有考慮日糧因素對(duì)內(nèi)源氮損失的影 響；回歸分析法與無(wú)氮日糧法并沒(méi)有本質(zhì)差異；高精氨酸法適用于日糧僅有唯一蛋白質(zhì)來(lái)源 的情況，且日糧賴氨酸胍基化的充分與否隨日糧蛋白質(zhì)來(lái)源的不同而有差異；氨基酸庫(kù)法涉 及到動(dòng)物體多個(gè)組織取樣和內(nèi)容物中內(nèi)源氨基酸的測(cè)定，在實(shí)際應(yīng)用中較為復(fù)雜；同位素標(biāo) 記內(nèi)源氮法的不足在于該方法計(jì)算過(guò)程較為復(fù)雜、費(fèi)用昂貴；同位素標(biāo)記外源氮法費(fèi)用昂貴， 且其最大疑義是隨著食入標(biāo)記飼料之后時(shí)間的延長(zhǎng)，再循環(huán)干擾增大，吸收后又進(jìn)入腸腔的 標(biāo)記內(nèi)源氮排泄量逐漸增多，外源氮流量測(cè)定值偏高，導(dǎo)致低估內(nèi)源氮排泄量；同時(shí)費(fèi)用昂 貴。

大氣中二氧化碳(CO₂)約含98.9％¹²C和1.1％¹³C同位素，光合作用過(guò)程中植物是排斥 ¹³C的，而動(dòng)物在利用日糧氨基酸合成體蛋白時(shí)并不排斥由¹³C來(lái)提供碳架。植物可通過(guò)兩條 途徑固定CO₂，一是C₄途徑，該途徑的CO₂受體是葉肉細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的磷酸烯醇式丙酮酸， 在磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化下，固定HCO₃^ˉ(CO₂溶解于水)，生成含四個(gè)碳原子的二羧 酸-草酰乙酸，所以這個(gè)反應(yīng)途徑稱為四碳雙羧酸途徑，簡(jiǎn)稱C₄途徑；其二是C₃途徑，該途 徑的CO₂受體是一種戊糖，即核酮二磷酸，故又稱為還原戊糖磷酸途徑，這個(gè)途徑的CO₂固 定最初產(chǎn)物是一種三碳化合物，故又稱為C₃途徑。植物在固定CO₂時(shí)，C₄途徑比C₃途徑對(duì) ¹³C的排斥程度低。小麥、大麥和大豆是C₃植物，而玉米、高粱和甘蔗是C₄植物。在植物生 理學(xué)上，¹³C豐度通常用δ¹³C(‰)表示，C₃和C₄植物的δ¹³C分別為-28.1±2.5‰和-13.5±1.5‰。， 其計(jì)算公式為：