[發明專利]一種浮游植物穩定同位素樣品的采集制備方法

在審

• 申請號: 201410593450.6
• 申請日: 2014-10-29
• 公開（公告）號: CN104297014A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 屈佩;王其翔;唐學璽;劉洪軍
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學;山東省海洋生物研究院
• 主分類號: G01N1/04
• 分類號: G01N1/04;G01N1/28;G01N1/40
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 蘇雪雪

技術領域

本發明涉及生物工程技術、生態學領域，特別涉及一種浮游植物穩定同位素樣品的采集制備方法。

背景技術

穩定同位素探測是一種較為成熟的物質流動傳遞示蹤技術，在國內外其他學科領域的應用較早，如氣候學、地球化學、植物生理學、考古學等，通過多年的理論論證和實踐，保證了該技術的可靠性。20世紀80年代以后，同位素質譜測試技術的進步大大拓寬了穩定同位素的應用領域。而其在生態環境方面的應用相對較新，大多被用于取代傳統的胃含物法，進行生態系統營養譜的構建。由于捕食者的攝食偏好及其新陳代謝中的同位素分餾現象，造成了同一生態系統中不同物種間的同位素比率差異。通過對比這些差異，我們可以得到各個物種間食性遠近關系，從而進行濕地生態系統中的生物功能群的劃分、分析消費者的食物組成、潮間帶生物的食物競爭能力評估、各消費者營養級和生態類群的劃分等。

隨著穩定同位素技術在生態學方面應用的不斷發展，尤其是海洋生態方面的應用不斷增多，穩定同位素的檢測涉及到了浮游植物。但是，由于浮游植物個體較小，分布分散，較難達到檢測要求。這就急需一種能夠適用于穩定同位素檢測的制備浮游植物樣品的方法。

發明內容

為了克服上述問題，本發明專利提供操作步驟簡單，成本低廉，適用于一般海域、湖泊的浮游植物穩定同位素樣品采集制備方法。

本發明采用如下技術方案：

1)在需要采集浮游植物的海區、湖泊或河流，利用水平拖網方式，使用浮游植物穩定同位素樣品采集網，對海洋浮游植物進行富集性采集；

所述浮游植物穩定同位素樣品采集網包括拉繩、網圈、網衣、富集杯和下蓋，所述采集網整體呈圓錐形，拉繩與網圈固定連接；網衣的上端與網圈連接，下端與富集杯連接；其中網口直徑為50cm、網口上的網圈為直徑1cm的不銹鋼條，網衣的孔徑為75μm，從網圈到富集杯下緣的長度為1m；所述富集杯是由上、下兩個杯圈和杯衣構成；所述杯衣的材質與所述網衣相同；所述下蓋用于封住所述富集杯的下口。

采集時，拖網的速度為2-3節；

每次拖網的時間為10min；

2)收集網內的浮游植物，迅速置于低溫瓶中，0-5℃保存；且在24小時內處理完成以下步驟；

3)將低溫瓶中的浮游植物樣品經過顯微鏡鏡檢，剔除>500μm的浮游動物，以及碎屑等干擾成分；

對于未剔除的浮游動物，按照調查獲得的當地生物量，計算精確的浮游植物比例，公式如下：

單個調查航次，浮游植物生物量比例：

要獲得相對準確的浮游植物生物量比例，進一步將各航次獲得的數據進行平均：Pn=P1+P2+P3+...Pnn;]]>

4)將經過步驟3)的浮游植物樣品分成兩份，其中第一份加入1mol/L的鹽酸中進行酸化處理1-2h，之后利用純水反復漂洗至中性；第二份不做處理；

5)利用抽濾的方式，將步驟4)處理后的兩份浮游植物樣品的水分分別濾除，濾除度>80％。

6)將抽濾后的兩份浮游植物濾餅分別移至鋁箔折成的方形無蓋盒中，置于烘箱烘干12-24h，之后分別經過研缽研磨得到兩份干燥的粉末狀浮游植物樣品。

所述第一份用于碳穩定同位素比率測定；第二份用于氮穩定同位素測定。

本發明的優點在于：本發明所述的方法具有高效簡單、成本低廉的特性，能夠廣泛的應用于海洋、湖泊生態調查研究。本發明采集方法所用的采集網設計合理，能夠比較全面的采集到海區的浮游植物，本發明的處理方法可以有效地排除雜質誤差的干擾，保證了浮游植物穩定同位素的測定質量；另外本發明的方法實現了浮游植物的富集、處理現場化，保證其新鮮程度的同時有效地節省了成本。本發明方法所獲得樣品的穩定同位素測定效果精度高。

附圖說明

本發明有如下附圖：