[發(fā)明專利]一種通過微生物催化乳酸合成己酸的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410593446.X
• 申請日: 2014-10-29
• 公開（公告）號: CN104357496A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陶勇;朱曉宇;何曉紅;李大平
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院成都生物研究所
• 主分類號: C12P7/40
• 分類號: C12P7/40;C12R1/145
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種通過微生物催化乳酸合成己酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

步驟一、將己酸功能菌群接種到含有液體培養(yǎng)基的厭氧發(fā)酵瓶中，25-35℃厭氧培養(yǎng)3-5d，得到OD₆₀₀為3-5的菌懸液；

步驟二、將上述菌懸液轉(zhuǎn)入含乳酸的培養(yǎng)液或廢水的厭氧反應(yīng)器中，保持反應(yīng)器溫度在25-35℃，使菌體吸附到固定化膜填料中，直至反應(yīng)器中菌懸液OD₆₀₀值不再下降；

步驟三、向步驟二的厭氧反應(yīng)器中加入15％-25％的含乳酸的培養(yǎng)液或廢水，25-35℃厭氧培養(yǎng)，通過NaOH和HCl控制反應(yīng)器pH在5.5-5.8；乳酸耗盡后，再以15％-25％的新鮮培養(yǎng)液/廢水替換，采用批次添加方式重復(fù)以上操作，直至己酸濃度>15g/L；

步驟四、待己酸濃度>15g/L穩(wěn)定5-7d后，改為連續(xù)方式泵入培養(yǎng)液或廢水，維持乳酸濃度在3-20g/L，通過連續(xù)發(fā)酵的方式，將乳酸轉(zhuǎn)化為己酸，得到含己酸的發(fā)酵液；

步驟五、提取發(fā)酵液中的己酸；

上述步驟一至四中所述的培養(yǎng)基為：5.0-25g乳酸，1g酪蛋白胨，0.25-4g酵母粉，0.4gNaHCO₃，0.1g半胱氨酸，0.045gK₂HPO₄，0.045gKH₂PO₄，0.09gNaCl，0.009gMgSO₄7H₂O，0.009g?CaCl₂，0.1mg刃天青，1mg氯化血紅素，1mg生物素，1mg維生素B₁₂，3mg對氨基苯甲酸，5mg葉酸和15mg維生素B₆，1000ml蒸餾水；

所述己酸功能菌群包括如下二個優(yōu)勢種群：Clostridium?IV，其豐度為55-65％；Clostridium其豐度為35-45％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，Clostridium?IV種群為Clostridium?leptum或Clostridium?sporosphaeroides；Clostridium?sensu?stricto種群為Clostridium?butyricum,Clostridium?tyrobutyricum,Clostridium?kluyveri,Clostridium?sporogenes；其中每個種群的微生物是所述的一種微生物或幾種微生物的任一比例組成。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述己酸功能菌群包括豐度為65％的Clostridium?IV種群，豐度為35％的Clostridium?sensu?stricto種群。

4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法，其特征在于，所述步驟二中的厭氧反應(yīng)器為上流式厭氧反應(yīng)器。