[發明專利]一種適配體電化學生物傳感器，其制備方法以及用途有效
| 申請號： | 201410591942.1 | 申請日： | 2014-10-29 |
| 公開（公告）號： | CN104391019B | 公開（公告）日： | 2017-08-18 |
| 發明（設計）人： | 王廣鳳;陳玲 | 申請（專利權）人： | 安徽師范大學 |
| 主分類號： | G01N27/26 | 分類號： | G01N27/26 |
| 代理公司： | 蕪湖安匯知識產權代理有限公司34107 | 代理人： | 張巧嬋 |
| 地址： | 241000 安徽省*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 適配體 電化學 生物 傳感器 制備 方法 以及 用途 | ||
1.一種適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將DNA序列分別溶解在PBS緩沖溶液中；
(2)將金電極(GE)先進行拋光和清洗；
(3)將含有探針S1和S2的緩沖溶液滴涂到金電極上，培養得到S2-S1/GE；
(4)將含有一定濃度的適配體的PBS緩沖溶液滴涂在S2-S1/GE電極上，培養；清洗電極后得到Aptasensor；
(5)將獲得的Aptasensor在含有HP1和HP2的緩沖溶液中培養，通過DNA雜交連鎖反應得到超夾心結構的修飾電極HP2-HP1-Aptasensor；
(6)將HP2-HP1-Aptasensor培養在含有銀離子和硼氫化鈉的緩沖溶液中，得到銀納米簇修飾的電極AgNCs/HP2-HP1-Aptasensor；
步驟(1)中，DNA序列包括：巰基化DNA：S1、與適配體特異性結合DNA：S2、發夾DNA 1：HP1、發夾DNA 2：HP2；所述DNA分別溶解在pH 7.4的PBS緩沖溶液中，并在低溫下保存備用。
2.如權利要求1所述的適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，包括如下步驟：
(2-1)將金電極用0.3μm的鋁粉進行拋光處理；
(2-2)將金電極用0.5μm的鋁粉進行拋光處理；
(2-3)放入HNO3:H2O體積比為1:1溶液，進行超聲波清洗，超聲清洗的時間為3～5min；
(2-4)放入乙醇溶液，進行超聲波清洗，超聲清洗的時間為3～5min；
(2-5)放入超純水中，進行超聲波清洗，超聲清洗的時間為3～5min。
3.如權利要求1所述的適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，將含有探針S1和S2的緩沖溶液滴涂到表面處理干凈的金電極上，培養6-10h,通過Au-S共價鍵作用自組裝S1和S2修飾的金電極S2-S1/GE。
4.如權利要求1所述的適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，將含有一定濃度的適配體的PBS緩沖溶液滴涂在S2-S1/GE電極上，培養30～40min后得到Aptasensor；徹底清洗后的修飾電極用氮氣干燥，保存備用。
5.如權利要求1所述的適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，將獲得的Aptasensor在含有HP1和HP2的緩沖溶液中培養10h，通過DNA雜交連鎖反應得到超夾心結構的修飾電極HP2-HP1-Aptasensor。
6.如權利要求1所述的適配體電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(6)中，在HP2的3’端是一段富胞嘧啶的序列，將HP2-HP1-Aptasensor培養在含有銀離子和硼氫化鈉的緩沖溶液中，得到銀納米簇修飾的電極AgNCs/HP2-HP1-Aptasensor。
7.一種適配體電化學生物傳感器，其特征在于，采用如權利要求1-6所述適配體電化學生物傳感器的制備方法制得。
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