[發明專利]一種快速檢測抗體的試紙條

有效

• 申請號: 201410588505.4
• 申請日: 2014-10-29
• 公開（公告）號: CN104330569A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 張薇;吳邊;金玉翠;龔華岳;王方杰;倪龍泉
• 申請（專利權）人: 武漢生命科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 唐萬榮

技術領域

本發明屬于生物檢測領域，具體涉及一種快速檢測抗體的試紙條。?

背景技術

目前，抗體檢測的方法眾多，除傳統的沉淀反應、凝集試驗、補體結合試驗外，標記免疫測定(如酶聯免疫測定、放射免疫測定、熒光免疫測定、發光免疫測定等)已成為主要的免疫測定技術，這些方法各自具備自己的優點，但是在便捷性、快速性等方面均存在不足。

?免疫膠體金技術是上世紀80年代繼熒光素、放射性同位素和酶三大標記技術后發展起來的固相標記免疫測定技術。該方法最大特點是簡單快速、特異敏感、不需儀器設備和試劑，幾分鐘內就可用肉眼觀察到顏色鮮明的檢測結果，并可保存其檢測結果。近年來，膠體金免疫層析技術己成為當今最快速的免疫學檢測技術之一，并越來越受到相關研究領域的關注。

?膠體金免疫層析技術的發展是基于膠體金標記技術的發展，膠體金溶液在一定條件下，由膠體金顆粒表面的負電荷，與蛋白質、多肽等物質上所帶的正電荷因靜電吸附作用而牢固結合，形成以膠體金標記的蛋白質復合物。這種金標記物可代替酶標記物形成顯色反應，形成肉眼可見的條帶。

近年來，疫苗保護性抗體的快速檢測日漸興起，但由于檢測方法的局限，已嚴重限制了該行業的發展。目前，膠體金標記的快速檢測抗體的檢測試紙都是由樣品墊、標記物結合墊、包被膜（其上劃有檢測線、質控線）和吸收墊組成，根據檢測原理的不同大體分為兩種：一種是將抗原標金，在標記物結合墊上包被膠體金標記的抗原，在包被膜上用待測抗體的抗體劃膜得到檢測T線；另一種是將抗原劃膜，在標記物結合墊上包被膠體金標記的待測抗體的抗體，在包被膜上用待測抗體的抗體標金得到檢測T線。現有研究表明：因為抗體蛋白性質較為穩定，所以對抗體蛋白的膠體金標記較為穩定，因此上述第一種方法所述的抗原的膠體金標記存在頗多問題，因為抗原多為病毒類，性質多樣，有的大小甚至比膠體金顆粒還大，且穩定性較差，因此很難直接將抗原標記在膠體金顆粒上；即使勉強能將抗原標記上，也需要抗原達到極高的純度，而對抗原病毒的純化是一項難度較大、成本較高的工程；也有人尋找抗原的重組抗原來代替這些天然抗原，但是很多抗原很難尋到能替代的重組抗原，而且即使有，成本也是極高的，由此說明，上述第一種方法的局限性比較高。上述的第二種方法使用待測抗體的抗體進行金標記，這種方法可以避免抗原金標記的問題，但在包被膜上使用抗原劃膜得到檢測T線，需要抗原具有較高的濃度和純度，這也增加了產品生產的成本和難度；另外將抗原劃到膜上，由于抗原穩定性較差，抗原劃膜后，很難長時間保存，因此試紙條的有效期極短。這些都是限制抗體快速檢測類試劑盒快速發展的原因。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，目的在于提供一種快速檢測抗體的試紙條，以實現對抗體的快速檢測。

為實現上述發明目的，本發明所采用的技術方案為：

一種快速檢測抗體的試紙條，由底板和相互搭接粘貼在底板上的樣品墊、抗原墊、標記物結合墊、包被膜和吸收墊組成，所述抗原墊上包被有與待測抗體相結合的抗原，所述標記物結合墊上包被有與所述抗原墊上包被的抗原相結合的標記抗體，所述包被膜上固定有檢測T線和質控C線，所述檢測T線上包被有待測抗體的抗體，所述質控C線上包被有與標記抗體相結合的抗體。

按上述方案，所述標記物結合墊、抗原墊和樣品墊為玻璃纖維、無紡布或聚酯膜；所述吸收墊為吸水紙，所述包被膜為硝酸纖維素膜。

按上述方案，?所述標記抗體為膠體金標記抗體。

按上述方案，?所述抗原墊的制備方法為：使用抗原保護液將抗原進行稀釋后均勻鋪在玻

璃纖維、無紡布或聚酯膜上，置于37℃，相對濕度低于40%的環境中，干燥4小時，制成抗原墊；所述抗原保護液的配方為：Na₂HPO₄?5.72g，NaH₂PO₄?0.624g，檸檬酸三鈉?8.5g，蔗糖?10g，疊氮鈉?1g，水定容至1L。

按上述方案，所述抗原為粗抗原，其中抗原的含量為40wt%~50wt%。