[發明專利]艾考糊精原料藥分子量及其分布測定方法

有效

• 申請號: 201410588286.X
• 申請日: 2014-10-28
• 公開（公告）號: CN105628797B
• 公開（公告）日: 2017-10-03
• 發明（設計）人: 張旭東;郭進;葉芳;李繼仁
• 申請（專利權）人: 華仁藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 青島聯信知識產權代理事務所(普通合伙)37227
• 代理人: 高洋

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及艾考糊精原料藥分子量及其分布測定方法。

背景技術

腹膜透析液是保證腹膜透析順利進行的重要元素之一。迄今為止，葡萄糖透析液仍是使用最多的腹膜透析液，在我國目前是唯一的透析液。

隨著透析技術的提高，臨床上不斷出現新型透析液，以多聚葡萄糖為滲透劑的艾考糊精(icodextrin)透析液就是其中的一種。對水解產物進行分子量和分子量分布測定是艾考糊精原料藥分析的重要工作之一。目前常用GPC法測定聚合物的分子量和分子量分布。該法所給出的是分子量相對值，且一般需采用標準對照品校準。對照品的結構與待測樣品結構的近似程度直接關系到分子量測定的準確與否。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供一種艾考糊精原料藥分子量及其分布測定方法，不需要用對照品建立標準曲線，而實現對艾考糊精絕對分子量的準確測定。

本發明的技術方案是：

一種艾考糊精原料藥分子量及其分布測定方法，采用凝膠滲透色譜GPC-激光光散射LS-示差檢測RI聯用的方法進行檢測，具體的步驟如下：

測定時將樣品制備成10mg/ml的溶液，取100μl進樣測定，采用凝膠柱SB-G為保護柱，色譜柱SB-802HQ和色譜柱SB-803HQ串聯，以0.2‰NaN₃醋酸鹽緩沖液為流動相，流速為0.5ml/min，柱溫30℃，檢測溫度35℃；記錄分子量及分子量分布。

優選的，所述0.2‰NaN₃醋酸鹽緩沖液的配制方法為：18.7g醋酸鈉、34.5mL冰醋酸和1g疊氮化鈉，加注射水使溶解定并稀釋至5L。

其中，色譜柱為SB-803HQ，用多羥基甲基丙烯酸甲酯填充材料排阻分子量為100000(以普魯蘭多糖計)的色譜柱；

色譜柱為SB-802HQ，用多羥基甲基丙烯酸甲酯填充材料排阻分子量為4000(以普魯蘭多糖計)的色譜柱；

本發明的有益效果是：

GPC-激光光散射聯用技術兼具了GPC法和光散射法的特點，能快速、準確地測定出高分子的重均、數均分子量，且測出的重均分子量為絕對分子量，不需要對照品校準，而實現對艾考糊精絕對分子量及其分布的準確測定。

附圖說明

附圖1為本發明的測定方法測定艾考糊精原料藥分子量及其分布的圖譜；

附圖2為0.2‰NaN₃溶液作為流動相的分離圖譜；

附圖3為醋酸鹽緩沖液作流動相的分離圖譜；

附圖4為0.2‰NaN₃醋酸鹽緩沖液作流動相的分離圖譜。

具體實施方式

本發明的具體實施方式如下：

實施例1：

一種艾考糊精原料藥分子量及其分布測定方法，采用凝膠滲透色譜GPC-激光光散射LS-示差檢測RI聯用的方法進行檢測，具體的步驟如下：

所使用的儀器為1、液相為Waters2695-2414

2、激光光散射儀為Wyatt DAWN HELEOS-Ⅱ

凝膠柱SB-G、色譜柱SB-802HQ和色譜柱SB-803HQ均為日本昭和電工株式會社所生產。

測定時將樣品制備成10mg/ml的溶液，取100μl進樣測定，采用凝膠柱SB-G為保護柱，色譜柱SB-802HQ和色譜柱SB-803HQ串聯，以0.2‰NaN₃醋酸鹽緩沖液為流動相，流速為0.5ml/min，柱溫30℃，檢測溫度35℃；所述0.2‰NaN₃醋酸鹽緩沖液的配制方法為：18.7g醋酸鈉、34.5mL冰醋酸和1g疊氮化鈉，加注射水使溶解定并稀釋至5L；記錄分子量及分子量分布。

以上方法檢測的圖譜為圖1所示，檢測結果如下表所示。

從上表可以看出以上各段的分子量分布情況，其中：分段1的重均分子量為1244，分為為1.2％；分段2的重均分子量為3243，分為為23.2％；分段3的重均分子量為10860，分為為50.2％；分段4的重均分子量為29270，分為為19.0％；分段5的重均分子量為13750，分為為92.4％。

實驗例：實驗針對流動相、流速、色譜柱的變換以及色譜柱的柱溫等條件進行了一系列的條件對比實驗。

實驗例1：