[發明專利]一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法

在審

• 申請號: 201410583701.2
• 申請日: 2014-10-28
• 公開（公告）號: CN104316478A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 胡開輝;張職視;孫淑靜
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78;G01N5/04
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：通過斑玉蕈菌包樣品處理，測定菌包含水量、總糖含量、還原糖含量、可溶性蛋白含量及菌包中的酶活力，測定斑玉蕈菌包成熟度。

2.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的樣品處理步驟為：斑玉蕈菌包培養60天開始至140天內，每隔10天取重量相差在2g以內且10天內重量減少在7g-9g的菌袋的菌包做為實驗樣品；將菌包每隔6cm等分成上中下三部分，各將培養料充分攪拌均勻，精確稱取10?g培養料于50?mL燒杯中，加40?mL蒸餾水于25?℃搖床搖勻2?h，取液體于50?mL離心管，9000?r/min離心15?min，上清液即為粗酶液；另稱取20?g于平皿中，80?℃烘干至恒重，測定含水量。

3.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的總糖含量測定方法：精確稱取0.25?g烘干至恒重的栽培料于10?mL離心管，加入5?mL雙蒸水和1.5?mL濃鹽酸，沸水浴中水解3?h，靜置冷卻后將上清液倒入50?mL錐形瓶，重新加入5?mL雙蒸水和1.5?mL濃鹽酸，沸水浴中水解2?h，靜置冷卻后將上清并入50?mL錐形瓶中，用雙蒸水洗滌定容至50?mL；

混勻后取1?mL重新定容至50?mL；然后9000?r/min離心15?min；取1?mL上清液，加入1?mL?5?%苯酚，快速加入5?mL濃硫酸，靜置10?min，混勻，30?水浴20?mi；490?nm測定吸光度；樣品吸光度代入標準曲線回歸方程即可得樣品的總糖濃度；樣品總糖濃度μg/mL＝樣品稀釋的總糖濃度×樣品稀釋倍數。

4.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的含水量測定方法：使用校準后pH計測定上清液測定pH，記錄平皿原始重量，每天稱量平皿和樣品總重量至重量不再減小則說明完全烘干，記錄數據并計算含水量。

5.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的還原糖含量測定方法：精確稱取烘干至恒重的栽培料0.5?g于10?mL離心管中，加入5?mL雙蒸水于沸水浴中煮沸2?h，然后9000?r/min離心15?min，取1?mL上清液，加入1.5?mL?DNS試劑，再沸水浴7?min，然后用冷流水冷卻終止反應，用蒸餾水定容至10?mL，充分混勻，在540?nm下測吸光度值，并代入葡萄糖標準曲線回歸方程查出相應的葡萄糖含量。

6.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的可溶性蛋白含量測定方法：取1?mL上清液，加入5?mL的考馬斯亮藍G-250工作液，顯色10?min后，在紫外分光光度計上測定595?nm處吸光值，蒸餾水做為空白對照，樣品吸光度代入牛血清白蛋白標準曲線回歸方程求得樣品的蛋白濃度，樣品蛋白質濃度μg/?mL＝樣品稀釋的蛋白質濃度×樣品稀釋倍數。

7.根據權利要求1所述的一種斑玉蕈菌包成熟度的測定方法，其特征在于：所述的菌包中的酶活力測定方法：在520?nm下測吸光度值，并從葡萄糖標準曲線查出相應的葡萄糖含量，計算成酶活力；酶活力單位的定義為：在上述條件下每分鐘水解底物生成1?μg葡萄糖所需的酶量定義為1個酶活力單位“U”。