[發明專利]用于非酶切非色譜純化方法原核表達融合蛋白Prx的類彈性蛋白多肽ELP有效
| 申請號： | 201410583428.3 | 申請日： | 2014-10-27 |
| 公開（公告）號： | CN104387473B | 公開（公告）日： | 2017-10-10 |
| 發明（設計）人： | 劉宏民;張貴星;王西新;章旭耀;王龍珍;王志茹;袁君;鄭一超;趙文;鄭甲信 | 申請（專利權）人： | 鄭州大學 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C07K14/00;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 鄭州聯科專利事務所(普通合伙)41104 | 代理人： | 時立新 |
| 地址： | 450001 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 非酶切非 色譜 純化 方法 表達 融合 蛋白 prx 彈性 多肽 elp | ||
1.一類彈性蛋白多肽ELP，其特征在于，
所述的類彈性蛋白多肽ELP為ELP-IN或前體蛋白ELP-IC-PrxI，ELP-IN是類彈性蛋白與N端內含肽的組合，ELP-IC是類彈性蛋白與C端內含肽的組合；
ELP-IN的DNA序列為SEQ ID NO:3，氨基酸序列為SEQ ID NO:4；
ELP-IC的DNA序列為SEQ ID NO:1，氨基酸序列為SEQ ID NO:2。
2.如權利要求1所述的類彈性蛋白多肽ELP組成的一對融合蛋白，其特征在于，由SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列組成。
3.如權利要求2所述的類彈性蛋白多肽ELP組成的一對融合蛋白DNA分子載體，其特征在于，分子載體為pET30a-ELP-IC-PrxI和pET28a-ELP-IN。
4.如權利要求3所述的類彈性蛋白多肽ELP組成的一對融合蛋白DNA分子載體的宿主細胞，其特征在于，宿主細胞為BL21(DE3)。
5.如權利要求1所述的類彈性蛋白多肽在原核表達融合蛋白PrxI中應用，其特征在于，采用非酶切非色譜純化方法來純化原核表達融合蛋白PrxI，其步驟如下：
純化后的蛋白ELP-IN和ELP-IC-PrxI按照質量比1:1在如下體系中25℃孵育4h，25℃條件下誘導自切0.5h，然后用ITC的方法純化獲得目的蛋白PrxI；
1×Reaction buffer：50mM Tris，100mM NaCl，5％Glycerol。
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