[發明專利]一種金花茶組培繁殖方法

有效

• 申請號: 201410581398.2
• 申請日: 2014-10-27
• 公開（公告）號: CN104285813A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 李桂娥;李志輝;羅燕英;黃曉娜;蔣昌杰;黃連冬;文萍;葉品明
• 申請（專利權）人: 南寧市金花茶公園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 鄒超賢

技術領域

本發明屬于植物繁殖技術領域，涉及組織培養育苗技術，尤其是涉及一種金花茶組培繁殖方法。

背景技術

1960年，我國科學工作者首次在廣西南寧一帶發現了一種金黃色的山茶花，被命名為金花茶。金花茶的發現轟動了全球園藝界、新聞界，受到了國內外園藝學家的高度重視，它被認為是培育金黃色山茶花品種的最優良原始材料。金花茶是一種古老的植物，極為罕見，與銀杉、桫欏、珙桐等珍貴“植物活化石”齊名，國外稱之為神奇的東方魔茶，被譽為“植物界大熊貓”、“茶族皇后”。此外，金花茶含有特殊的色澤遺傳基因，具有重要的科研價值。經科學鑒定，金花茶含有特殊的金花茶皂甙、黃酮類、茶多酚、維生素及氨基酸等人體所需的營養成分，富含對人體具有重要保健作用的天然有機鍺、硒、錳、釩、鋅、鈷等微量元素，其化學成分多達400多種，國內外目前還未發現一種可食用植物，其稀有元素含量能如此豐富齊全給予一體的。目前，在全世界已發現的46個原種和5?個變種的金花茶植物中，約有28?個原種和5?個變種產自廣西。但是長期以來由于各種人為和自然因素以及物種自身因素，現存野生金花茶組植物資源稀少，甚至位于國家瀕危野生動植物之列，是我國八種國家一級保護植物之一（1984.7國務院文件），屬《瀕危野生動植物種國際貿易公約》附錄Ⅱ中的植物種，也已被列為廣西壯族自治區重點保護野生植物。

然而，傳統的茶花繁殖方法(扦插、嫁接、壓條、播種)對金花茶的植株和種子材料需求量大，嚴重制約珍稀瀕危金花茶物種的保護和大量繁殖；同時，這一繁育瓶頸也使得一些名貴的結實率低的茶花雜交新品種難以擴大推廣。因此，實現金花茶的快速繁殖是當前金花茶育種工作者的當務之急。?

植物組織培養是在無菌條件下，將植物的離體器官、組織、細胞或原生質體，培養在人工配制的培養基上，人為控制培養基條件，使其生長、分化、增殖，發育成完整植株的過程。由于組織培養是在脫離植物母體的條件下進行的，所以也稱為離體培養。植物組織培養具有所需植株原材料少，不受生長季節限制，培養周期短，變異低，可保持母本的優良遺傳特性等優點；因此，植物組織培養技術可用于拯救瀕危植物，解決植物產種子少或無而無法大量繁殖的難題。植物組織培養技術無疑是茶花育種工作者的福音，這為金花茶的繁育提供了更加可行的方案，避免了雜交一代的純種選育工作，大大縮短了育種期限。已有茶花育種工作者進行了相關方面的研究，李建安等（2003）對小果油茶和廣寧紅花油茶的花藥進行離體培養，并誘導形成愈傷組織；陳麗華（2007）等以云南紅花油茶的嫩芽及帶芽嫩莖段為外植體材料，研究探索其莖尖組織培養的外植體處理方法和叢芽誘導培養基，篩選出了云南紅花油茶較適宜的叢芽誘導培養基；高宇瓊和賴鐘雄（2010）以金花茶子葉胚切塊和成年植株葉片為材料，進行愈傷組織培養研究，成功誘導出愈傷組織，并能較好地繼代。在前人的報道中，關于金花茶的組培研究相對較少，特別在金花茶組培苗誘導生根方面未見報道。

發明內容

發明目的:本發明為了克服金花茶種質資源稀少，結果率低，傳統育苗方法所需材料多、周期長等技術問題，提供了一種降低金花茶組培生產成本，提高生產效率的金花茶組培繁殖方法。?

技術方案:為了實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種金花茶組培繁殖方法，包括無菌苗的獲取、無菌芽的增殖、叢生芽壯芽培養、增殖擴繁和生根培養的工序，通過選取金花茶種胚作為外植體后接種于初代培養基中獲取金花茶無菌芽，再將無菌芽接種于繼代增殖培養基和壯芽培養基中，重復循環增殖和壯苗的過程，直至獲得大量無菌苗，最后轉接至生根培養基中進行生根培養，具體操作步驟如下：

（1）無菌苗的獲取：選取金花茶種子作為外植體，對外植體進行消毒滅菌后，接種于初代培養基，以獲取金花茶無菌苗；

（2）無菌芽的增殖：將無菌芽切成頂芽和帶芽莖段分別接種于繼代增殖培養基上，誘導無菌芽增殖，獲得叢生芽；

（3）壯苗培養：將增殖獲得的金花茶無菌叢生芽單個切下轉接至壯苗培養基中，促進無菌芽伸長增壯；

（4）增殖擴繁：將步驟（3）的金花茶無菌苗再次接種于步驟（2）的增殖培養基中繼續增殖，然后再重復步驟（3），循環往復，使得無菌芽進行重復循環增殖和壯苗的過程，直至獲得大量無菌芽；步驟（2）和步驟（3）的繼代周期均為5-6周；

（5）生根培養：選取健壯、高度為4-6cm的金花茶無菌苗轉接至生根培養基進行生根培養。