[發明專利]從鉤吻提取物中制備阿枯米定堿的方法

在審

• 申請號: 201410572431.5
• 申請日: 2014-10-23
• 公開（公告）號: CN104402887A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 唐建華;龔聰;袁啟峰;畢海林
• 申請（專利權）人: 重慶方通動物藥業有限公司
• 主分類號: C07D471/22
• 分類號: C07D471/22
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 李強

技術領域

本發明涉及一種阿枯米定堿的制備方法，特別是涉及一種從鉤吻提取物中分離制備阿枯米定堿的方法。?

背景技術

鉤吻(Gelsemium?elegans?Benth.)為馬錢科胡蔓藤屬植物，分中國鉤吻和北美鉤吻兩種。我國盛產于福建、浙江、廣西、廣東、湖南等地，又名斷腸草。其藥用部位為全草。具有祛風攻毒，消腫止痛的功效。?

鉤吻堿類化合物是存在于鉤吻中的一類化合物，被證明在腫瘤、鎮痛等方面有較好的活性。臨床上用于抑制腫瘤細胞生長、治療神經痛、局部用于擴瞳等作用，可以被認為是鉤吻藥效的物質基礎之一。?

阿枯米定堿是自鉤吻中分離得到的一種鉤吻堿類化合物，其含量較高，具有一定的開發新藥的潛力。其藥理作用主要包括：其能抑制腫瘤細胞生長，鎮痛、鎮靜等作用。目前尚無公開的技術關于阿枯米定堿的制備方法。雖然有相關采用高速逆流色譜儀進行制備，該制備方法操作繁瑣，設備費用昂貴，制備量少，不利于工業化生產。因此，阿枯米定堿分離手段的不足是限制其醫藥用途的一個主要原因。?

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種從鉤吻提取物中制備阿枯米定堿的方法，以解決現有技術中制備手段繁瑣，產率極低的技術問題。?

為解決上述技術問題，本發明的從鉤吻提取物中制備阿枯米定堿的方法，包括步驟：?

(1)甲醇回流提取步驟?

將鉤吻藥材粗粉(過40-100目篩)加入75-90％甲醇提取，藥材與甲醇比例為3:1～10:1，回流提取萃取3次，合并提取液，減壓回收溶劑至無醇味兒，得提取液；將提取液進行離心處理，轉速為3000-8000rpm，離心后取上層清液。離心后除去了較多的雜質，簡化了后續的純化過程。?

(2)二氯甲烷萃取步驟?

將鉤吻提取物的上層清液加入適量氨水調節pH值到9-11，用體積比為0.5:1～3:1的二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷層，減壓回收溶劑，得萃取純化的浸膏A；?

(3)硅膠色譜純化步驟?

將步驟(2)所得浸膏A用100-200目或200-300目柱層析硅膠柱色譜分離，并以二氯甲烷-甲醇體積比為200:1～30:1進行洗脫，將洗脫液薄層硅膠板(GF254)點樣后于紫外燈254nm下觀察，合并含有阿枯米定堿的流份，減壓回收溶劑，得浸膏B；?

(4)反相C18色譜純化步驟?

將步驟(3)所得的浸膏B用15％甲醇溶解后，反相硅膠分離，40-80％的甲醇梯度洗脫，將洗脫液薄層硅膠板(GF254)點樣后于紫外燈254nm下觀察，合并含有阿枯米定堿的流份，減壓回收溶劑，即得純化的阿枯米定堿；?

其中，所述硅膠色譜純化步驟與反相色譜純化步驟的順序可以顛倒。?

作為優選，所述步驟(1)中鉤吻提取物中所用的提取溶劑為體積濃度為75％～90％的甲醇溶液；鉤吻提取物的水溶液濃度相當于生藥0.5g·ml^-1～1.0g·ml^-1。?

作為優選，所述二氯甲烷萃取中，鉤吻提取物的水溶液與二氯甲烷溶液的體積比為0.5:1～2:1。?

作為優選，所述硅膠色譜純化步驟中，硅膠為100-200目或200-300目柱層析硅膠或薄層層析硅膠，浸膏樣品與硅膠重量比為1:50～1:200。?

作為優選，所述反相色譜純化步驟中，浸膏樣品與C18反相硅膠重量比為1:40-1:80。?

采用本發明的方法依次經(1)甲醇提取、(2)二氯甲烷萃取，(3)硅膠色譜純化，(4)反相色譜純化。能極大地提高得率，因此，該方法是一種制備阿枯米定堿的簡化工藝，可用于阿枯米定堿的工業制備。?

具體實施方式

下面將結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明。?

實施例1?

鉤吻藥材1kg，去除雜質后粉碎成粗粉(過40目篩)，體積濃度為75％甲醇5L回流提取3次，每次2小時，合并提取液，回收溶劑得提取液約1L；將提取液進行離心處理，轉速為4000rpm，離心后取上層清液。?

將上層清液用氨水調節pH值為9，后用2L二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷層，減壓回收溶劑得浸膏A約100g。?