[發明專利]富血小板血漿的提取方法和提取的富血小板血漿

有效

• 申請號: 201410570704.2
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN104383726A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 林卓衡
• 申請（專利權）人: 博雅干細胞科技有限公司
• 主分類號: B01D21/26
• 分類號: B01D21/26;A61K35/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本申請是2012年7月30日提交的中國專利申請號201210267055X，發明名稱為“富血小板血漿的提取方法和提取的富血小板血漿”案的分案申請，其全部內容引入本文作為參考。?

技術領域

本發明屬臨床醫學技術領域，具體涉及一種提取富含血小板的血漿的方法，本發明方法在特定條件下獲得的富血小板血漿具有血小板濃度高、血小板回收率高等至少一個方面的優點。?

背景技術

富含血小板的血漿，在本發明中可稱為富血小板血漿(Platelet?Rich?Plasma，PRP)，其是是通過離心血液而得到的含高濃度的血小板血漿。人體的血小板除了可以在止血的時候提供凝聚作用外，血小板中還含有很多與創傷愈合和骨頭再生有關的多種生長因子。如血小板衍生生長因子(Platelet?Derived?Growth?Factor，PDGF)，轉化生長因子(Transforming?Growth?Factor，TGF)，胰島素樣生長因子(Insulin-like?Growth?Factor，IGF)，表皮生長因子(Epidermal?Growth?Factor，EGF)以及血管內皮生長因子(Vascular?Endothelial?Growth?Factor，VEGF)等等，血小板來源的生長因子，對細胞的分化和增殖起著促進作用，這些生長因子相互之間具有協同響應，與其他促進細胞活性的因子相互作用和影響，共同維持著組織環境的平衡，對傷口愈合、修復和再生有著重要的作用。?

另外，由于PRP可以從患者自身血液中提取，經提取富集處理后，可用于相關疾病的治療，因而來源豐富，取材方便，制備方法簡單而且可以讓身體吸收。自身PRP使用能避免病毒傳播和免疫排斥的問題出現。因此PRP被廣泛應用到不同的醫學領域中。如骨科、口腔科、頜面外科、運動醫學以及美容醫學。?

PRP在目前為止還沒有一個統一的制備方法，PRP的制備原理主要是利用血液中各種成分沉降速度不同，通過離心將血液分層。從而獲取含血小板的血漿，并利用離心原理進一步的濃縮以獲得高濃度的血小板血漿。人體全血中血小板的濃度一般為1～3×10⁵/ml。研究認為濃縮后的PRP血小板濃度應為全血血小板濃度的3-4倍。研究也發現PRP中血小板濃度的提高能有效提高干細胞的增殖和分化能力以及能夠顯著增加成纖維細胞的增殖和I型膠原蛋白的表達。?

因此有效的分離和提高PRP中血小板的濃度成為了整個PRP治療方案的關鍵。?

林庶茹等(CN101402940A，中國專利申請號：200810228726.5，發明名稱：一種小鼠血小板的提取方法)公開了一種小鼠血小板的提取方法，小鼠眶靜脈取血，置于抗凝離心管中，靜置30MIN后離心，800RPM離心10MIN，上清液即為富含血小板的血漿。吸出上清液置于干凈試?管中，3500RPM離心10MIN，棄去上清液，管底沉淀物為血小板。向試管中滴加50～100ΜL質量濃度為1％草酸銨溶液，以玻璃棒輕輕攪拌，再加入質量濃度為1％草酸銨溶液2～3ML，靜置5MIN，使紅細胞溶解。3500RPM離心10MIN，棄去上清，加入血小板洗滌液并反復吹打，使成為血小板混懸液，3300RPM離心10MIN，棄去上清，加入少量血小板洗滌液并反復吹打使之成為混懸液。該血小板將作為抗原免疫豚鼠后，取豚鼠血清給小鼠注射，制備過敏性紫癜模型。此方法操作簡單，可以得到高濃度的血小板，并很好地解決血小板純度不佳的問題。這種針對小鼠血液進行血小板富集的方法雖然據信可以獲得濃度達10¹⁰的血小板，然而該方法未公開其血小板的收率，并且方法在操作上比較繁雜，難以適用于人血的處理。?

此外，王悅等(CN?102078644?A，中國專利申請號201110053979.5，發明名稱：一種簡便高效的自體富血小板血漿提取裝置及提取方法)中公開了一種簡便高效的自體富血小板血漿提取裝置及提取方法,所提取的自體富血小板血漿中含有多種復合生長因子,能夠有效地促進組織的修復。由1個注射器、1個靜脈輸液器連接管、1個靜脈留置針塑料卡片和1個靜脈輸液器針頭組成；注射器用以抽取靜脈血并充當離心管；靜脈輸液器針頭通過靜脈輸液器連接管和注射器出口連接,靜脈輸液器針頭用以皮膚血管穿刺、抽取抗凝劑和激活劑并向人體需要部位注射提取后的自體富血小板血漿；靜脈輸液器連接管可彎曲固定于靜脈留置針塑料卡片中。據信這種裝置在提升血小板提取的操作性方面是有益的。?

因此為了從血液中富集血小板而得到有臨床治療意義的富血小板血漿，探尋一種操作過程簡單、收率高、富集的血漿中血小板濃度高的方法，是本領域技術人員迫切期待的。?