[發明專利]一種具有抗腫瘤活性的化合物、其制備方法及應用

無效

• 申請號: 201410570673.0
• 申請日: 2014-10-24
• 公開（公告）號: CN104327148A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 樸香蘭;邢韶芳
• 申請（專利權）人: 中央民族大學
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種酮類化合物，尤其涉及一種從植物絞股藍(Gynostemma?pentaphyllum)中提取得到的具有抗腫瘤活性的皂苷類化合物；本發明還涉及該皂苷類化合物的制備方法以及該化合物在醫藥中的應用，屬于植物化學領域。

背景技術

絞股藍為葫蘆科(Cucurbitaceae)絞股藍屬(Gynostemma)絞股藍Gynostemma?pentaphyllum(Thunb.)Makino的全草，目前國內有絞股藍茶、絞股藍濃縮汁、絞股藍龍須茶、富硒養生茶等多個系列產品。現代藥理學表明，絞股藍具有抗癌作用、抗氧化作用、降血糖作用、降血脂作用、增強免疫作用等。

在天然植物中有些有較強活性的皂苷類化合物，來源有限而且存在于植物內的含量較低，用傳統的分離方法，不但需要大量的藥用資源，而且得率也低。因此，如何提高稀有活性成分的含量或獲得更有活性的成分成為現代藥學研究的重點。研究表明，人參屬植物經加熱處理后其生物活性之所以顯著增強是因為熱處理后原藥材中的低極性、稀有或微量人參皂苷，如稀有人參皂苷Rh2、Rg3、Rb3等，含量明顯增加。具有“南方人參”美譽的絞股藍中最主要的藥效成分是皂苷類成分，本實驗室前期研究發現，經高溫高壓處理的絞股藍中的側鏈C20位連有羥基的絞股藍皂苷(如gypenoside?L和gypenoside?LI等)以及具有C20(21)和C20(22)雙鍵的絞股藍皂苷(如達木林B和達木林A等)等稀有絞股藍皂苷含量明顯增加，藥效學實驗驗證其抗癌作用大大增強。鑒于此，我們對熱處理的絞股藍進行了進一步的提取、分離與活性實驗。

發明內容

本發明人在對絞股藍熱處理產物的有效成分研究中分離得到具有結構式(I)的新化合物，在現有文獻中從未報道，于是對其進一步進行了藥理實驗，從而完成了本發明。

本發明目的之一是提供一種下述式(I)的化合物：

其中，R₁、R₂和R₃彼此獨立選自OH或糖基；R₄和R₅分別選自H或OH，且二者互異；

優選的：R₁或R₃為OH；R₂為糖基；R₄或R₅為OH；

特別優選的，所述化合物的結構式為式(II)所示：

本發明的另外一個目的是提供制備上述式(I)化合物的方法。

本發明的另外一個目的是通過以下技術方案來實現的：

一種制備上述式(I)化合物的方法，包括：

(1)將植物絞股藍的干燥全草的粗粉在高溫高壓下熱處理后，用乙醇回流提取，提取液減壓回收溶劑，得乙醇提取浸膏；

(2)乙醇提取浸膏加蒸餾水混懸后，用二氯甲烷萃取，再用乙酸乙酯萃取；回收溶劑，得乙酸乙酯萃取物；

(3)將乙酸乙酯萃取物通過HP20樹脂，用20％乙醇、50％乙醇洗脫后，用70％乙醇進行洗脫，70％乙醇洗脫液減壓濃縮，得70％乙醇洗脫物；將70％乙醇洗脫物上硅膠柱色譜，用20∶1～10∶1體積比的二氯甲烷/甲醇洗脫，分段收集洗脫液得到6個組分，將其中第3個組分用半制備色譜柱(250×10mm，5μm)，流速為3mL/min，用53∶47體積比的乙腈/水洗脫，即得。

上述制備方法中，步驟(1)中優選將絞股藍干燥全草的粗粉在125℃、0.24MPa條件下熱處理3h，用90％乙醇回流提取3次，3次回流提取的時間依次為2h、2h和1h；合并提取液，提取液減壓回收溶劑，得乙醇提取浸膏；

步驟(2)中優選將乙醇提取浸膏加10倍重量的蒸餾水混懸，用二氯甲烷萃取，再用乙酸乙酯萃取，回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物。

本發明式(I)化合物具有較強的抑制癌細胞增殖活性，具體來說具有(I)化合物結構的絞股藍皂苷gypenoside?L，已有文獻報道其對腫瘤細胞具有較明顯的抑制作用。

附圖說明

圖1本發明化合物絞股藍皂苷Jh1(gypenoside?Jh1)的LC-MS圖譜

圖2化合物絞股藍皂苷Jh1(gypenoside?Jh1)和gypenoside?L對HepG2細胞株的抑制率曲線，圖中“*”表示p＜0.05，“**”表示p＜0.01

具體實施方式

實施例1本發明化合物的制備