[發明專利]一種養心菜的組織培養一步成苗快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201410570569.1
• 申請日: 2014-10-22
• 公開（公告）號: CN104255532A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 李媛;侯可雷
• 申請（專利權）人: 李媛;侯可雷
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種養心菜的組織培養一步成苗快速繁殖方法，屬于植物組織培養技術領域。

背景技術

目前養心菜的生產繁殖以分株繁殖和扦插繁殖為主。具體如下:1、扦插繁殖選取當年生長健壯枝條，切成10-15cm長的莖段，去掉基部葉片，每莖段留3.4葉，打頂，插人畦內，人土3一5cm，澆一次透水，一般7-10天生根成活，枝條最好隨剪隨種，20天后即可移栽定植。也可在大田直接扦插，定植密度為行距25cm，穴距15cm，每穴2-3株。2、分株繁殖將要分株的養心菜連根挖起，按每一段帶有2個以上根芽的標準進行分株，然后按株行距15cm?x25cm進行分植。挖苗時謹慎操作，盡量不破壞母株，切下的每一段根盡量多帶根芽，以縮短緩苗時間。定植后鋪好滴灌帶，并滴適量的壓根水。

上述養心菜常規繁殖方法系數低，生長緩慢，難以形成規模化生產。用組織培養技術，既可保持它的優良特性，又能在短期內獲得大量的試管苗，且移栽成活率高，生長迅速，可克服常規繁殖方法的不足，對緩解人們對費菜的需求可能有一定的參考價值。

常規的植物組織培養再生途徑主要為外植體完全脫分化形成愈傷組織，然后將愈傷組織轉移到分化培養基上分化出芽，再將其轉移到生根培養基上誘導生根。但該途徑較煩瑣，種質易產生變異，再生頻率不高。

發明內容

本發明為了解決問題，進而提供了一種養心菜的組織培養一步成苗快速繁殖方法。

本發明為解決上述技術問題采取的技術方案是：所述方法是按下述步驟進行的：

步驟一、取無病蟲害、生長健壯的養心菜葉片作外植體，然后消毒滅菌；

步驟二、一步成苗培養：將消毒滅完菌的葉片切成面積為0.4-0.6cm²塊狀后接種到培養基上，接種后培養基置于溫度為25士2℃條件下，全黑暗培養，7至10天后進行光照培養至生根；

步驟三、試管苗的馴化與移栽：將生根苗取出，放到光照充足的煉苗室內，3至5天后將瓶口打開繼續煉苗2至3天；然后取出試管苗，洗凈根部培養基，移栽基質中，基質由泥炭土與蛭石構成，其中泥炭土與蛭石的重量份數比為1:1，起初7天保證每天給小苗噴霧2-3次。

進一步的，步驟一外植體的消毒滅菌方法如下：在洗潔精水中清洗10min后，除去葉片表面污物，流水中沖洗30min；在無菌條件下，用70％酒精浸泡45s，無菌水沖洗3次，再在0.1％升汞溶液浸泡4min，然后用無菌水沖洗5次，無菌濾紙吸干表面水分。

進一步的，步驟二的光強為20001x，14h/d的光照。

進一步的，步驟二中以MS培養基為基礎的培養基，在1LMS培養基中，添加不同濃度的6-芐基腺嘌呤、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、糖和瓊脂組合，糖為蔗糖或者葡萄糖，其中6-芐基腺嘌呤濃度為1.0mg/L、2.0mg/L或3.0mg/L，萘乙酸濃度為0.1mg/L、0.2mg/L或0.4mg/L，2,4-二氯苯氧乙酸濃度為0.0mg/L、0.1mg/L或0.2mg/L。

進一步的，步驟二的培養基配方為MS+6-BA?2.0mg/L、2,4-D?0.2mg/L、NAA?0.2mg/L、蔗糖25g/L和瓊脂7.0g/L，培養基的pH值為5.8。

進一步的，步驟二中培養基為MS+6-BA?1.0mg/L、2,4-D?0.2mg/L、NAA?0.2mg/L、葡萄糖25g/L和瓊脂7.0g/L，培養基的pH值為5.8。

本發明的有益效果是：養心菜以葉片作為外植體一步成苗法是外植體在形成愈傷組織后，不需要轉移到分化培養基上，而是直接在原培養基上分化，分化的順序通常是先根后芽，直止形成健壯的全苗。再生周期短，繁殖系數和再生頻率高，易操作，培養程序簡單，不影響增殖率，能保持原種特性，便于大規模生產。

附圖說明

圖1是養心菜葉片接種后，愈傷組織分化出的小芽照片；圖2是一步培養成的組培苗照片；圖3是馴化移栽成功的組培苗。

具體實施方式

具體實施方式一：本實施方式以下結合具體實施例對本發明做進一步描述和說明。所述方法是按下述步驟進行的：

步驟一、取無病蟲害、生長健壯的養心菜葉片作外植體，然后消毒滅菌；

步驟二、葉片愈傷組織的誘導：將消毒滅完菌的葉片切成面積為0.4-0.6cm2塊狀后接種到培養基上，接種后培養基置于溫度為25士2℃條件下，全黑暗培養，7至10天后進行光照培養至生根；