[發(fā)明專利]一種無明膠水痘疫苗凍干制劑及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410567730.X
• 申請(qǐng)日: 2014-10-22
• 公開（公告）號(hào): CN105582534A
• 公開（公告）日: 2016-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬相虎;王亮;楊月蓮;周鋒;謝蕾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海生物制品研究所有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): A61K39/25
• 分類號(hào): A61K39/25;A61K9/19;A61P31/22
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 馬莉華;崔佳佳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疫苗制造領(lǐng)域。具體地，涉及制備具有高安全性的無明膠水痘 疫苗凍干制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

水痘是一種高度傳染性疾病，其發(fā)生具有明顯的季節(jié)性和周期性。通過預(yù) 防接種水痘疫苗是目前控制病毒傳播的唯一方法。由日本大阪大學(xué)微生物疾病 研究所(BIKEN)的學(xué)者建立的VZVOka株，是目前國際上唯一獲得WHO認(rèn)可 的疫苗株。臨床研究證明，Oka株水痘疫苗接種反應(yīng)輕微，能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生良 好的、持久的免疫應(yīng)答和保護(hù)效果。

現(xiàn)行水痘減毒活疫苗所用穩(wěn)定劑為含谷氨酸鈉、蔗糖和明膠的磷酸鹽緩沖 液，其中明膠成分是動(dòng)物源性輔料，不但容易引起過敏反應(yīng)，還存在潛在感染 動(dòng)物源性病毒的安全隱患。然而，在凍干制劑的制備過程中，若缺少了明膠， 會(huì)造成凍干支架建立不足，制劑呈薄膜狀，凍干制劑的水份蒸發(fā)少，從而極易 導(dǎo)致減毒病毒株的死亡，而這樣制備的疫苗制劑則極不穩(wěn)定。

目前，現(xiàn)有技術(shù)中也嘗試開發(fā)各種替代明膠的疫苗制劑，然而，新加入的 制劑卻造成了更多比明膠更為嚴(yán)重的副作用，例如右旋糖酐與海藻糖的組合反 而造成偶有過敏反應(yīng)如蕁麻疹、皮膚瘙癢、發(fā)熱、惡心、嘔吐等的副作用。因 此無明膠的水痘制劑至今遲遲無法上市。因此，尚無一種能夠合理替代明膠的 水痘疫苗制劑輔料，能達(dá)到相同的病毒株穩(wěn)定性的同時(shí)還使其安全性更高。

因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)一種穩(wěn)定、安全、副作用少的疫苗穩(wěn)定劑以及 相應(yīng)的水痘疫苗。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種不含明膠、右旋糖酐或動(dòng)物蛋白的水痘疫苗凍干制劑及 其制備方法。

本發(fā)明第一方面，提供了一種水痘疫苗凍干制劑，所述的凍干制劑含有水痘 疫苗原液和疫苗穩(wěn)定劑，其中，所述疫苗穩(wěn)定劑按疫苗原液初始濃度計(jì)，含有以下 組分：

蔗糖3-10％，

谷氨酸鈉0.01-1％；

任選的緩沖液余量；

且所述的凍干制劑不含明膠、右旋糖酐、和/或動(dòng)物源性蛋白。

在另一優(yōu)選例中，所述的凍干制劑在加入生理鹽水后能形成pH為7.0的水痘 疫苗復(fù)溶液。

在另一優(yōu)選例中，所述的緩沖液含有氯化鈉、氯化鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二 氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀；較佳地，含有氯化鈉、氯化鉀、磷酸氫二鈉、 磷酸二氫鉀。

在另一優(yōu)選例中，所述的緩沖液中，各組分的濃度為：氯化鈉0.9％、氯化鉀 0.1％、磷酸氫二鈉1.5％、磷酸二氫鉀0.2％。

在另一優(yōu)選例中，所述的動(dòng)物源性蛋白包括人血白蛋白。

在另一優(yōu)選例中，所述的蔗糖按疫苗原液初始濃度計(jì)為5-8％，較佳地，為 5.5-7.5％。

在另一優(yōu)選例中，所述的疫苗穩(wěn)定劑還含有海藻糖。

在另一優(yōu)選例中，所述的海藻糖的量基于疫苗原液初始濃度計(jì)，為0.8-5％， 較佳地，為2-4％。

在另一優(yōu)選例中，所述的凍干制劑在10℃以下保存18-24個(gè)月后病毒滴度下 降0.5-0.6。

在另一優(yōu)選例中，所述的凍干制劑制備如下：

(i)以水痘病毒為毒種，感染MRC-5人二倍體細(xì)胞株并培養(yǎng)，從而獲得受 水痘病毒毒株感染的MRC-5人二倍體細(xì)胞；

(ii)將(i)中受水痘病毒毒株感染的MRC-5人二倍體細(xì)胞破細(xì)胞并收集上 清液，從而獲得水痘疫苗原液；

(iii)將(ii)中所述的水痘疫苗原液與權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定劑混合，從 而獲得水痘疫苗制劑；

(iv)將(iv)中的水痘疫苗制劑經(jīng)凍干工藝后獲得水痘疫苗的凍干制劑，其 中所述凍干工藝中，凍結(jié)溫度為-32±2℃，和/或干燥時(shí)間為16±1小時(shí)。

在另一優(yōu)選例中，所述水痘疫苗的毒株來自水痘Oka株。

本發(fā)明第二方面，提供了一種制備本發(fā)明第一方面所述水痘疫苗凍干制劑 的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)以水痘病毒為毒種，感染MRC-5人二倍體細(xì)胞株并培養(yǎng)，從而獲得受 水痘病毒毒株感染的MRC-5人二倍體細(xì)胞；

(ii)將(i)中受水痘病毒毒株感染的MRC-5人二倍體細(xì)胞破細(xì)胞并收集上 清液，從而獲得水痘疫苗原液；

(iii)將(ii)中所述的水痘疫苗原液與本發(fā)明第一方面所述的穩(wěn)定劑混 合，從而獲得水痘疫苗制劑；