[發明專利]一種半枝蓮提取物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201410566949.8
• 申請日: 2014-10-21
• 公開（公告）號: CN104644744A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 顧瓊;吳泰宗;徐峻;袁巖;王倩;王彥
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K36/539
• 分類號: A61K36/539;A61P31/22;C07D307/58;A61K31/365
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明涉及中藥材提取技術領域，更具體地，涉及一種半枝蓮提取物及其制備方法和應用。

背景技術

人類皰疹病毒根據其生物學特征可分為α、β和γ三種亞型，其中EB病毒(Epstein-Barr?virus)屬于γ亞型，也稱為4型人類皰疹病毒(HHV-4)。EB病毒是1964年Epstein和Barr最先從非洲兒童惡性淋巴瘤(Burkitt?lymphoma)體外培養的淋巴瘤細胞系中，用電鏡發現的一種新的皰疹病毒，并命名為EB病毒。EBV的基因組為線性雙鏈DNA，長度172kb，編碼約100個基因。與人類皰疹病毒一樣，EBV有兩種生活周期，潛伏期和裂解期。在潛伏期EBV只表達少量的基因以逃逸宿主的殺傷；而在裂解期EBV表達幾乎全部的基因，病毒進行大量復制以維持其生命活動并使疾病進展。EBV編碼的早期基因ZTA和RTA表達可以啟動下游大量基因表達，使EBV由潛伏期進入裂解期。EBV可以感染人類的B淋巴細胞、上皮細胞和NK/T細胞等。與EBV相關的人類疾病有傳染性單核細胞增多癥、慢性活動性EBV感染、EBV相關嗜血淋巴組織細胞增生癥、Burkitt’s淋巴瘤、何杰金病、鼻咽癌等。雖然已經證實EBV感染可以引起上述疾病，但目前還沒有一種針對于γ皰疹病毒的特效藥。目前醫藥界迫切需要針對EBV感染疾病的特效藥，從而改善γ型人類皰疹病毒相關惡性疾病的治療效果。從中草藥中發現天然抗皰疹病毒活性化合物或先導物是目前國內外研究的重要的方面和非常活躍的領域。至今發現的一些天然化合物具有抗EBV活性，分屬于倍半萜、三萜、黃酮、木質素類等。目前約有近百個品種正在進行臨床前研究和臨床實驗。中草藥半枝蓮為唇形科黃芩屬植物半枝蓮的干燥全草，在我國分布廣泛，資源豐富。該植物具有突出的抗菌、消炎、抗病毒及抗腫瘤等功能，現多單用或者與其他藥組成復方，治療肝癌、肺癌、乳腺癌、肝硬化等疾病。目前從半枝蓮全草中發現的化合物主要是黃酮化合物和一系列具有細胞毒性的新克羅烷型二萜類化合物。但現有技術中未見有半枝蓮提取物及其新克羅烷型二萜成分的抗EBV病毒裂解復制活性的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供半枝蓮提取物在制備防治EB病毒感染的藥物中的應用。

本發明的另一個目的在于提供一種新的來源于半枝蓮新克羅烷型二萜類化合物。

本發明的另一目的在于提供所述的半枝蓮提取物的制備方法。

本發明通過研究發現，半枝蓮提取物對EB病毒復制有良好的抑制作用，因此，本發明要求保護半枝蓮提取物在制備防治EB病毒感染藥物中的應用。

所述半枝蓮提取物的制備方法為，將半枝蓮(Scutellaria?barbata)全草，曬干，粉碎，用95％乙醇室溫浸提三次，每次24小時，合并濃縮液，分別用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓濃縮回收溶劑，得到乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分先過大孔樹脂(D101)，以乙醇/水梯度洗脫，得到6個餾分。各餾分再分別過硅膠柱，反相C₁₈柱和半制備液相色譜柱，反復分離得到。

其中，所述的乙醇/水體系中乙醇和水的體積比為：0:100、10:90、20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20:、95:5、100:0。

本發明從半枝蓮提取物中分離得到3種新結構的化合物和4種已知結構的化合物，這七種化合物對EB病毒復制有良好的抑制作用，這七種化合物的結構分別如下：

新化合物1-3可以統一用式(Ⅰ)所示結構來表示，化合物1-7可以統一用式(Ⅱ)所示結構來表示。

所以本發明要求保護一種從半枝蓮提取物中分離的新克羅烷型二萜類化合物，具有式(Ⅰ)所示結構：

從半枝蓮提取物中分離的結構式如式(Ⅱ)所示的化合物在制備防治EB病毒感染藥物中的應用，

防治EB病毒感染的藥物，含有有效量如上所述的半枝蓮提取物和/或藥學上可接受的載體。

防治EB病毒感染的藥物，含有有效量如上式(Ⅱ)所述的化合物中的一種或多種和/或藥學上可接受的載體。

與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：

本發明首次研究發現，半枝蓮提取物對EB病毒復制有良好的抑制作用，而且，本發明從半枝蓮提取物中分離得到3種新結構的化合物和4種已知結構的化合物，這七種化合物對EB病毒復制有良好的抑制作用，在制備防治EB病毒感染的藥物中具有很大的應用前景。

附圖說明