[發(fā)明專利]一種四季桂組培快繁方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410556952.1
• 申請日: 2014-10-14
• 公開（公告）號: CN104351048A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設計）人: 王迅;蔡金術(shù);謝云軍;向盈;曹莉
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳文科園林股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領域

本發(fā)明屬于農(nóng)林業(yè)技術(shù)領域，具體涉及一種四季桂組培快繁的方法。?

背景技術(shù)

桂花的常規(guī)扦插因受季節(jié)時間、地區(qū)環(huán)境差異和桂花生長速度等因素的限制，存在生根慢、生長慢、擴繁周期長和擴繁倍數(shù)低等缺陷，尤其對于一些珍貴的優(yōu)良品種，由于來源稀缺而導致遲遲不能推廣。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)來彌補常規(guī)育苗的不足，對于來源稀缺的珍貴桂花品種的推廣具有極大的應用價值。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于利用植物離體再生的特性，通過組織培養(yǎng)構(gòu)建四季桂的離體再生系統(tǒng)，從而達到增加桂花擴繁增殖倍數(shù)，減少生根所需時間，提高產(chǎn)量。?

本技術(shù)的實施包括以下具體步驟：?

(1)外植體的選取和消毒：取四季桂當年生的莖尖，剪成小段后，用酒精和升汞進行消毒；?

(2)初代培養(yǎng)：配制初代培養(yǎng)基并滅菌，將消毒后的外植體在無菌操作臺上接種于初代培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)室進行培養(yǎng)，每天光照14小時，溫度控制在為20～26℃；?

(3)增殖繼代培養(yǎng)：初代培養(yǎng)10～20天后，將未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；?

(4)生根培養(yǎng)：繼代培養(yǎng)1個月左右，將腋芽萌發(fā)長度超過1cm的外植體轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)；?

(5)煉苗移栽：生根20天后，將生根的培養(yǎng)瓶移至大棚并敞開瓶口，煉苗3～5天后，將瓶苗移出培養(yǎng)瓶洗凈附著的培養(yǎng)基，最后移至裝有營養(yǎng)土的塑料缽中。?

具體實施方式：

(1)外植體的選取和消毒：選取當年生半木質(zhì)化或木質(zhì)化的四季桂莖尖，取回后用肥皂清洗2～3遍，再用流水沖洗0.5～1小時，之后在無菌操作臺上用消過毒的鑷子和解剖刀將外植體切成1～2厘米長的小段，每段至少含一個腋芽，用消毒的紗布包裹住以75％的酒精處理10～30秒，再用0.1％的升汞處理3～10分鐘，最后用無菌水漂洗3～6遍。?

(2)初代培養(yǎng)：將消毒處理后的外植體在無菌操作臺上接入初代培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)室進行培養(yǎng)，每天光照14小時，溫度控制在為20～26℃；培養(yǎng)基成份為B5基礎培養(yǎng)基+3％?的蔗糖+0.7％的瓊脂粉，pH為5.8，并添加10％的桂花葉浸出物，培養(yǎng)基配制好后進行高壓滅菌；所述桂花葉浸出物用新鮮桂花葉10g在研缽中研磨碎后，加入100ml水混合后用濾紙過濾，取濾液。?

(3)增殖繼代培養(yǎng)：初代培養(yǎng)10～20天后，將未染菌的外植體轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，每兩周更新一次培養(yǎng)基，繼代時截去底端褐化部分1～2mm；繼代培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎上添加1～2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.2～0.5mg/L的吲哚丁酸。?

(4)生根培養(yǎng)：繼代培養(yǎng)1個月左右，將腋芽萌發(fā)長度超過1cm的外植體轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，生根培養(yǎng)時，先進行5～10天左右的暗培養(yǎng)，再移至光照培養(yǎng)室進行正常培養(yǎng)；生根培養(yǎng)基的成份是在初代培養(yǎng)基的基礎上添加1～2mg/L的萘乙酸和2～3mg/L的吲哚丁酸。?

(5)煉苗移栽：生根20天后，將生根的培養(yǎng)瓶移至大棚并敞開瓶口進行煉苗，煉苗時在瓶內(nèi)噴灑10％的多菌靈，保持其濕度不低于70％，煉苗3～5天后，將瓶苗移出培養(yǎng)瓶洗凈附著的培養(yǎng)基，最后移至裝有營養(yǎng)土的塑料缽中；營養(yǎng)土宜采用肥沃的黃土并添加少量陶粒，移栽前的營養(yǎng)土要用多菌靈澆透。?

需要說明，根據(jù)上述說明書的闡述，本發(fā)明所屬領域的技術(shù)人員還可以對上述實施方式進行變更和修改。因此，本發(fā)明并不局限于上面所述的具體實施方式，對本發(fā)明的一些等同修改和變更也應當在本發(fā)明的權(quán)利要求的保護范圍。同時，本說明書中使用的一些特定的術(shù)語并不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。?