[發明專利]利用孤雌鹵蟲克隆種群罕見雄體定向雜交育種的方法

無效

• 申請號: 201410555766.6
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104255674A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 王智超;武軍元;賀江濤;賀婷婷
• 申請（專利權）人: 塔里木大學
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 張中南

技術領域

本發明涉及一種雜交育種的方法，特別是涉及一種利用孤雌鹵蟲克隆種群罕見雄體定向雜交育種的方法。

背景技術

鹵蟲作為一種使用方便且營養優良的鮮活餌料，目前廣泛應用于經濟魚蝦蟹水產養殖業和家庭水族養殖領域，尤其是其初孵無節幼體作為水產動物苗種(幼體)的開口活餌料具有重要和廣泛的應用價值。

目前商品鹵蟲卵主要靠捕撈鹽湖或沿海鹽場的野生休眠卵，由于產量波動大，造成價格波動也大，我國內蒙古及沿海地區嘗試進行人工增養殖也是靠捕撈天然鹵蟲卵進行引種養殖。目前我國還沒有適合人工養殖的鹵蟲的雜交良種。究其原因，主要是目前國際上廣泛認同的鹵蟲兩性生殖物種有七種(Artemia?salina，Artemia?franciscana，Aremia?monica，Artemia?urmiana，Artemia?persimilis，Artemia?sinica，Artemia?tibetiana)，而這七個物種的鑒定恰恰是根據生殖隔離和地理隔離現象確定的，這七個兩性鹵蟲物種之間不能進行雜交或者出現后代不育現象。因此利用兩性鹵蟲不同物種進行雜交育種而篩選良種不可能實現。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用孤雌鹵蟲克隆種群罕見雄體定向雜交育種的方法，以彌補現有技術的不足。

研究已發現，鹵蟲除了進行兩性生殖的七個物種外，全世界還分布有大量孤雌生殖的鹵蟲種群(300多個分布點)，而有些孤雌生殖的鹵蟲種群可以產生少量的罕見雄體(比例1％左右)，而這些罕見雄體都具有正常的雄性生殖功能，可以與某些兩性生殖的鹵蟲進行雜交。考慮到孤雌鹵蟲種群分布廣，數量大，遺傳背景豐富，篩選獲得具有優良經濟性狀的克隆化種群容易，因此本發明以孤雌生殖鹵蟲的克隆種群罕見雄體為父本，與兩性鹵蟲中具有優良經濟性狀的雌性個體(母本)進行定向雜交育種，可以快速篩選獲得同時具有父本和母本優良性狀的雜交后代。

本發明的雜交育種方法如下：

第一步建立孤雌生殖型鹵蟲克隆種群。根據育種目的定向選取具有某種經濟性狀(如耐寒、耐高溫或抗病等)的孤雌生殖鹵蟲的天然鹵蟲卵孵化出無節幼體，在養殖容器中進行單個體隔離養殖至性成熟，在正常養殖條件下使其分別產生大量的后代而建立克隆種群(所謂克隆種群是指單一雌性通過孤雌生殖方式產生的大量后代而形成的種群)。

第二步獲取具有該經濟性狀的克隆種群罕見雄體。方法是以克隆種群中的雌性為對象進行上述按育種目的定向選取的經濟性狀測定與確認，再根據雌雄形態特征差異從該克隆種群中挑選出罕見雄體。即以第一步克隆種群中的雌性(通常占種群數量99％左右)為對象進行所選的目的經濟性狀的測定，再次確認所獲得的克隆種群具有所選目的經濟性狀；由于克隆種群中的鹵蟲都是來自同一母體,因此通常克隆種群中雌性與罕見雄體具有相同的經濟性狀，從克隆種群中根據雌雄外部形態特征差異不難揀選出具有相應經濟性狀的罕見雄體(占1％左右)用于后續的雜交。

第三步以第二步獲得的罕見雄體為父本與已有的兩性生殖型雌性鹵蟲為母本(該母本與父本經濟性狀互補)進行雜交。利用雜交子代F1，按照常規的雜交育種方法對雜交后代進行篩選，即可獲得同時具有父本和母本經濟性狀且能穩定遺傳的雜交良種。

本發明的上述經濟性狀包括優良的生長性狀、繁殖性狀或抗性性狀等。

本發明的雜交育種的方法應用于定向培育具有優良生長性狀、繁殖性狀或抗性性狀等鹵蟲新品種。

顯然本發明克服了現有技術不能進行鹵蟲雜交育種的不足，使數量巨大的孤雌生殖鹵蟲的優良經濟性狀可以在雜交育種中得以利用，這樣不但增加了父本可選經濟性狀的多樣性，而且達到了可以根據實際需求來進行鹵蟲定向育種的目的,該發明為鹵蟲雜交育種的規模化和產業化提供了技術支持。

具體實施方式

本發明以下面的實施例的詳細具體的操作方法或步驟，僅僅選取了一種育種目的來進一步說明，該實例的育種目的是為了獲得一種能適宜人工集約化養殖的人工可控繁殖方式的鹵蟲品種,更具體的育種目標是實現雜交后代同時具有光周期敏感性和產小直徑卵兩個經濟性狀，即是同時具有光周期敏感性和產小直徑卵兩種經濟性狀組合的優良新品種。

實施例1

本發明的育種方法如下：

第一步根據文獻資料篩選出可能具有光周期敏感型的孤雌生殖類型鹵蟲種群，本實例利用的是新疆孤雌生殖類型的鹵蟲野生休眠卵，在常規孵化條件孵化出無節幼體，然后在常規養殖水體中，利用50毫升離心管分管單個體養殖構建成多個克隆種群。