[發(fā)明專利]合成高純2?酮酸鹽的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410552490.6
• 申請(qǐng)日: 2014-10-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104372035B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許崗;曾紅宇;王勝鋒;帥得利
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南寶利士生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12P7/40
• 分類號(hào): C12P7/40
• 代理公司: 長(zhǎng)沙市融智專利事務(wù)所43114
• 代理人: 魏娟

1.合成高純2-酮酸鹽的方法，其特征在于，在反應(yīng)液中，具有式1結(jié)構(gòu)的醛類化合物和甘氨酸原料在L-蘇氨酸醛縮酶和L-蘇氨酸脫氨酶復(fù)合酶的催化作用下，于pH為6.0～8.0，溫度為20～40℃的條件下進(jìn)行酶催化反應(yīng)，生成具有式2結(jié)構(gòu)的2-酮酸產(chǎn)物；所得2-酮酸產(chǎn)物經(jīng)層析分離提純后，采用堿金屬碳酸鹽或堿金屬碳酸氫鹽調(diào)節(jié)pH至4.0～8.0，再依次進(jìn)行活性炭脫色、濃縮結(jié)晶、真空干燥，即得具有式3結(jié)構(gòu)的2-酮酸鹽；所述的L-蘇氨酸醛縮酶和L-蘇氨酸脫氨酶復(fù)合酶中L-蘇氨酸醛縮酶與L-蘇氨酸脫氨酶的總活力比為3～4:2～3；

其中，

R為C₁～C₄的脂肪烴基；

M為堿金屬離子；

所述的活性炭脫色是將提純和調(diào)節(jié)pH后的2-酮酸產(chǎn)物維持溫度在20～40℃范圍內(nèi)，加入活性炭進(jìn)行吸附0.5～1.0h；所述的活性炭為木質(zhì)活性炭；所述活性炭的使用量為所述2-酮酸產(chǎn)物體積的3.0～5.0‰；

所述的層析分離是通過(guò)強(qiáng)酸性的磺酸型樹(shù)脂或疏水性的吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，R為C₁～C₄的直鏈烷烴基、烯烴基、炔基中一種。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，L-蘇氨酸醛縮酶相對(duì)醛類化合物的加入量為30000U/mol～80000U/mol，L-蘇氨酸脫氨酶相對(duì)醛類化合物的加入量為20000U/mol～60000U/mol。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，醛類化合物在反應(yīng)液中的質(zhì)量百分比濃度為2％～6％，醛類化合物與甘氨酸的摩爾比為1:1～1.05。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的堿金屬碳酸鹽為Na₂CO₃或K₂CO₃；所述的堿金屬碳酸氫鹽為NaHCO₃或KHCO₃。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的酶催化反應(yīng)以反應(yīng)液中甘氨酸殘留量低于0.2wt％為反應(yīng)終點(diǎn)。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的真空干燥是在真空度大于0.09MPa，溫度在60～80℃范圍內(nèi)的條件下進(jìn)行。