[發明專利]一種從甜菊葉中提取分離萊鮑迪苷A的方法

有效

• 申請號: 201410551259.5
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104262428A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 陳少云;余祖兵;周建海;冒小云;顧和英;顧丹彤
• 申請（專利權）人: 南通海天生物科技有限公司
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08
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• 代理人: 暫無信息

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技術領域

本發明屬于生物提取技術領域，具體涉及一種從甜菊葉中提取分離萊鮑迪苷A的方法。

背景技術

甜菊糖苷是從甜菊葉中提取分離得到的一種高甜度低熱能、味質好、且安全無毒的天然低熱糖源，其甜度為蔗糖的150～300倍，可以替代糖精或蔗糖，應用于各種食品、飲料中。甜菊糖苷還可以防止糖尿病、肥胖癥及小兒齲齒等疾病，是患者的理想甜味劑。但甜菊糖的苦味一直影響它的推廣和運用，日本和韓國采用轉移酶和水解酶化的方法來改變甜菊糖的后苦味；不足的是帶來的副作用往往是甜度倍數下降，成本增高。同樣造成應用上的困難。但隨著天然甜味劑市場需求的逐步增大，越來越多的企業開始關注研究和解決甜菊的后苦味，人們試圖提煉精致高純度的萊鮑迪苷A的甜菊產品，去掉口感不好的成分甜菊雙甙和杜克甙，這樣甜度可高達350-400倍，同時除掉了甜菊的后苦味。目前韓國、馬來西亞、美國、中國等的一些企業都可以將萊鮑迪苷A提純到80%以上，但由于各自工藝和方法的差異，普遍存在轉化率低，成本高，有效成分控制不穩定等弊端。

發明內容

發明目的：本發明針對現有技術中工藝復雜、提取純度低的不足，提出一種工藝簡單、成本低以及純度高的從甜菊葉中提取分離萊鮑迪苷A的方法。

技術方案：本發明所述的一種從甜菊葉中提取分離萊鮑迪苷A的方法，包括如下步驟：

（1）準備提取溶劑準備階段；

（2）混合階段：將甜菊葉與上述提取溶劑按質體比1：10～20混合；

（3）升溫提取階段：將上述混合物加熱升溫至80～90℃，并保溫1.5-2.0小時；

（4）過濾離心階段：將提取混合物先通過目數為300目的布袋過濾器，再通過轉速為4000轉/分鐘的碟片離心機，離心至澄清，冷卻至40℃以下；

（5）大孔樹脂吸附分離階段：將冷卻后的提取過濾澄清液上大孔吸附樹脂吸附，水洗后再用50%-80%乙醇解吸；

（6）分子膜分離階段：將上述解吸液用分子膜分離，HPLC跟蹤分析，將含有萊鮑迪苷A純度達85%以上的溶液合并收集；

（7）濃縮階段：將收集液用刮板濃縮器減壓濃縮至比重為1.1～1.5；

（8）放置階段：將濃縮液在40℃以下的溫度放置12-24小時，萊鮑迪苷A充分析出；

（9）固液分離階段：用離心或板框壓濾的方法進行固液分離，過濾濾材孔徑大于400目；

（10）溶劑漂洗階段：將分離的固體物用95%-100%的乙醇水溶液，按固體物質量的2-4倍進行漂洗15-30分鐘；

（11）二次固液分離：用離心或板框壓濾的方法進行再次固液分離，過濾濾材孔徑大于400目；

（12）干燥：將分離的固形物用烘干或噴霧干燥的方法進行干燥。

作為優化，步驟（1）所述提取溶劑為乙醇與水的混合物。

進一步的優化，所述提取溶劑為乙醇與水按照溶劑的比例按1：10～100%混合。

作為優化，步驟（6）所述分子膜為組合膜，具體是1000-5000分子量卷式超濾膜、100-600分子量卷式納濾膜，HPLC跟蹤分析膜濾液中萊鮑迪苷A的純度。

有益效果：通過本發明的提取方法能使提取的萊鮑迪苷A純度達到97%以上，且該方法工藝路線簡單，對設備要求不高，而且具有低能耗、高產出、萊鮑迪苷A純度穩定、徹底去除后苦味等優點，適合工業化生產的優點。

附圖說明

圖1為實施例1中的萊鮑迪苷A?對照品溶液HPLC圖譜及分析表；

圖2為實施例1中的萊鮑迪苷A膜濾液HPLC圖譜及分析表；

圖3為實施例1中的萊鮑迪苷A?樣品溶液HPLC圖譜及分析表；

圖4為實施例2中的萊鮑迪苷A?對照品溶液HPLC圖譜及分析表；

圖5為實施例2中的萊鮑迪苷A膜濾液HPLC圖譜及分析表；

圖6為實施例2中的萊鮑迪苷A?樣品溶液HPLC圖譜及分析表；

圖7為實施例3中的萊鮑迪苷A?對照品溶液HPLC圖譜及分析表；

圖8為實施例3中的萊鮑迪苷A膜濾液HPLC圖譜及分析表；

圖9為實施例3中的萊鮑迪苷A?樣品溶液HPLC圖譜及分析表。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明：

實施例1

一種從甜菊葉中提取分離萊鮑迪苷A的方法，包括如下步驟：

（1）提取溶劑準備階段：乙醇與水的比例為20%；

（2）混合階段：甜菊葉與乙醇混合溶劑按質體比1：15；