[發(fā)明專利]一種七葉樹組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410550654.1
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104255530A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權(quán)）人: 南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及七葉樹的組織培養(yǎng)，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

七葉樹，Aesculus?chinensis?Bunge，七葉樹科，又稱梭欏樹、梭欏子、天師栗，落葉喬木，高達25米，樹皮深褐色或灰褐色，小枝、圓柱形，黃褐色或灰褐色，無毛或嫩時有微柔毛，有圓形或橢圓形淡黃色的皮孔；掌狀復(fù)葉，由5~7小組成，葉柄長10~12厘米，有灰色微柔毛，小葉紙質(zhì)，長圓披針形至長圓倒披針形，稀長橢圓形鉀先端短銳尖，基部楔形或闊楔形，邊緣有鈍尖形的細(xì)鋸齒；花雜性，雄花與兩性花同株，花萼管狀鐘形，長3~5毫米，外面有微柔毛，裂片鈍形，邊緣有短纖毛，花瓣4，白色；果實球形或倒卵圓形，頂部短尖或鈍圓而中部略凹下，直徑3~4厘米，黃褐色，無刺，具很密的斑點，果殼干后厚5~6毫來，種子常1~2?粒發(fā)育，近于球形，直徑2~3.5厘米，栗褐色，種臍白色，約占種子體積的1/2，花期4~5月，果期10月。中國黃河流域及東部各省均有栽培，僅秦嶺有野生，自然分布在海拔700m以下之山地，喜光，也耐半蔭，細(xì)紋和濕潤氣候，不耐嚴(yán)寒，喜肥沃深厚土壤。從七葉樹中萃取的天然活性成分：七葉素，通過抑制膠原蛋白酶等與肌膚紋理和完整性密切相關(guān)的酶類，促進微循環(huán)，維持細(xì)胞正常代謝，從而促使毛孔收斂，潔凈，滋養(yǎng)，使肌膚細(xì)致無瑕。七葉樹以播種繁殖為主，由于其種子不耐貯藏，如干燥極易喪失生命力，故種子成熟后宜及時采下，隨采隨播。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是七葉樹組織培養(yǎng)的繁殖方法，本發(fā)明方法通過研究篩選出組培各階段的最佳培養(yǎng)基配方和主要影響因素，找出最佳的技術(shù)參數(shù)組合，從而建立最適宜的七葉樹組織培養(yǎng)體系，為七葉樹藥用資源的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案：

取七葉樹的種子在濃硫酸中層積處理2h，流水沖洗2h，放入磨口廣口瓶中，在超凈工作臺上用70%乙醇震蕩滅菌處理30s，50%的氯胺水震蕩滅菌處理15min，無菌水沖洗5次，吸水紙吸干表面水分，消毒處理過的七葉樹的種子接種到不加激素的1/2MS培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，培養(yǎng)出來的無菌苗切取根以上部分接入MT+1mg/L6-BA+1mg/LGA₃培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)，加入8-10mg/L的牛血清蛋白，誘導(dǎo)出來的腋芽接入MT+1mg/L6-BA+0.5mg/LKT培養(yǎng)基中進行叢生芽的增殖，培養(yǎng)條件為附加蔗糖40g/L，瓊脂7.5g/L，培養(yǎng)溫度26℃，光照強度3000lx，光照時間12h/d，誘導(dǎo)出來的叢生芽接入3/4MT+0.1-0.2mg/LIBA培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂7.5g/L，培養(yǎng)溫度28℃，光照強度8000lx，光照時間16h/d。

采用本發(fā)明制備的七葉樹生根率高，利用率大，利于大規(guī)模種植。

下面將結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

取七葉樹的種子在濃硫酸中層積處理2h，流水沖洗2h，放入磨口廣口瓶中，在超凈工作臺上用70%乙醇震蕩滅菌處理30s，50%的氯胺水震蕩滅菌處理15min，無菌水沖洗5次，吸水紙吸干表面水分，消毒處理過的七葉樹的種子接種到不加激素的1/2MS培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，培養(yǎng)出來的無菌苗切取根以上部分接入MT+1mg/L6-BA+1mg/LGA₃培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)，加入8mg/L的牛血清蛋白，誘導(dǎo)出來的腋芽接入MT+1mg/L6-BA+0.5mg/LKT培養(yǎng)基中進行叢生芽的增殖，培養(yǎng)條件為附加蔗糖40g/L，瓊脂7.5g/L，培養(yǎng)溫度26℃，光照強度3000lx，光照時間12h/d，誘導(dǎo)出來的叢生芽接入3/4MT+0.1mg/LIBA培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂7.5g/L，培養(yǎng)溫度28℃，光照強度8000lx，光照時間16h/d，生根率93%。

實施例2