[發明專利]一種刺桐組織培養的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410550345.4
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104285799A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京帝道農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及刺桐的組織培養，屬于生物技術領域。

背景技術

刺桐，Erythrina?variegata?Linn.，又稱海桐、山芙蓉、空桐樹、木本象牙紅，豆科，落葉喬木，高約20m，干皮灰色，具圓錐形皮刺；三出復葉互生，小葉菱形或菱狀卵形；總狀花序，花萼佛焰狀暗紅色，花蝶形，鮮紅色，花期3月；莢果呈念珠狀，種子紅色。此花原產印度及馬來西亞等地，性強健，萌發力強，生長快，開花時新梢可長達1.5米，花序長達50厘米，喜溫暖濕潤、光照充足的環境，耐旱也耐濕，對土壤要求不嚴，喜肥沃排水良好的砂壤土，不甚耐寒，見于樹旁或近海溪邊。樹皮含生物堿下箴刺桐堿、刺桐靈、甜菜堿、膽堿，樹皮或根皮入藥，稱海桐皮，祛風濕，舒筋通絡，治風濕麻木，腰腿筋骨疼痛，跌打損傷，對橫紋肌有松弛作用，對中樞神經有鎮靜作用。目前常用的繁殖方法為扦插，扦插成活率偏低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是刺桐組織培養的方法，本發明可以控制條件，不受季節限制，全年連續生產，生長繁殖率高，并且保持原有的優良性狀不變，可以實現優良無性系或單株迅速推廣。

為解決上述技術問題，本發明采用下列技術方案：

切取3cm的刺桐帶芽莖段放入500ml磨口廣口瓶中，包上紗布，流水沖洗30min，在超凈工作臺上先用50%的Bleach水溶液消毒4min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.2%的升汞溶液滅菌12min，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的刺桐帶芽莖段接種到1/2Miller+0.1mg/L2，4，5-D+0.1mg/LIAA+1-2mg/L谷胱甘肽+15-20mg/L夾竹桃霉素的培養基中進行腋芽的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂9g/L，培養溫度26℃，光照強度2000lx，光照時間11h/d，pH5.8，培養基采用121℃、1.1kp進行高壓滅菌15min，誘導出來的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.1mg/LNAA+IAA0.1mg/L培養基中進行叢生芽的增殖，培養出來的叢生芽接入培養基為1/2Miller+1mg/LIBA+0.5mg/LIAA進行生根誘導，附加蔗糖20g/L，瓊脂8g/L，培養溫度28℃，光照強度7000lx，光照時間15h/d，pH5.8，培養基采用121℃、1.1kp進行高壓滅菌15min，培養條件均采用人工光照，封閉式，試管苗長至4cm，根數為3，揭開封口膜，在培養室內放置7d，然后取出單苗洗凈根上附帶的培養基，把根浸入800-1000倍的多菌靈溶液消毒3min，栽植于草炭：珍珠巖=1:1的基質里，栽植后10d內用塑料薄膜保濕，以1/4MS營養液進行葉面噴灑。

采用本發明制備的刺桐成活率高，操作簡單無污染，利于大規模種植。

下面將結合具體實施方式對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

切取3cm的刺桐帶芽莖段放入500ml磨口廣口瓶中，包上紗布，流水沖洗30min，在超凈工作臺上先用50%的Bleach水溶液消毒4min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.2%的升汞溶液滅菌12min，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的刺桐帶芽莖段接種到1/2Miller+0.1mg/L2，4，5-D+0.1mg/LIAA+1mg/L谷胱甘肽+15mg/L夾竹桃霉素的培養基中進行腋芽的誘導，附加蔗糖25g/L，瓊脂9g/L，培養溫度26℃，光照強度2000lx，光照時間11h/d，pH5.8，培養基采用121℃、1.1kp進行高壓滅菌15min，誘導出來的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.1mg/LNAA+IAA0.1mg/L培養基中進行叢生芽的增殖，培養出來的叢生芽接入培養基為1/2Miller+1mg/LIBA+0.5mg/LIAA進行生根誘導，附加蔗糖20g/L，瓊脂8g/L，培養溫度28℃，光照強度7000lx，光照時間15h/d，pH5.8，培養基采用121℃、1.1kp進行高壓滅菌15min，培養條件均采用人工光照，封閉式，試管苗長至4cm，根數為3，揭開封口膜，在培養室內放置7d，然后取出單苗洗凈根上附帶的培養基，把根浸入800倍的多菌靈溶液消毒3min，栽植于草炭：珍珠巖=1:1的基質里，栽植后10d內用塑料薄膜保濕，以1/4MS營養液進行葉面噴灑，成活率88%。

實施例2