[發(fā)明專利]一種香薷總黃酮的制備方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410550340.1
• 申請(qǐng)日: 2014-10-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104288223A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K36/53
• 分類號(hào): A61K36/53;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種香薷總黃酮的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

香薷，又名香菜、香茅，為唇形科石薺苧屬植物，具有解表、化濕、祛暑、消腫之功效，臨床主要用于惡寒發(fā)熱、腹痛吐瀉、小便不利等癥狀的暑濕感冒。香薷含有多種黃酮類化合物成分，據(jù)研究，香薷全草中含有7-甲基黃芩素、芹菜素、木犀草素、咖啡酸和槲皮素等黃酮類化合物。

黃酮類化合物具有降脂、抗衰老、抗氧化、抗血栓、清除自由基、抗心律失常、抗癌等功效。目前，對(duì)香薷化學(xué)成分的研究主要集中在揮發(fā)油，對(duì)其黃酮類成分的研究少見(jiàn)報(bào)道。

傳統(tǒng)的提取方法包括溶劑提取、沉淀分離法、水蒸氣蒸餾法、分子蒸餾技術(shù)等。雖然這些方法在天然產(chǎn)物提取被大多數(shù)人采用，但也存在不少缺點(diǎn)，如提取過(guò)程中普遍使用大量有機(jī)溶劑；處理時(shí)間長(zhǎng)；操作步驟多等。因而實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣品損失嚴(yán)重，產(chǎn)生的誤差較大。

本發(fā)明采用現(xiàn)代的超聲提取技術(shù)，快速高效的提取香薷總黃酮。且通過(guò)文獻(xiàn)檢索，?國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)香薷總黃酮用于制備抗腫瘤藥物。

發(fā)明內(nèi)容

為滿足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療腫瘤疾病，本發(fā)明提供一種香薷總黃酮的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

a.將香薷全草陰干、粉碎，過(guò)40目篩；

b.將處理后的原料置于頻率為20KHz的超聲裝置中，加入原料3~4倍的70~80%的乙醇溶液，設(shè)置超聲溫度為70~80℃，時(shí)間為2~3h，過(guò)濾，濾渣重復(fù)提取1次，合并濾液；

c.將合并的濾液濃縮至原體積的1/8~1/10，濃縮液加入大孔吸附樹(shù)脂柱純化，先用2~3BV的蒸餾水洗脫，再用65~75%的乙醇洗脫，收集洗脫液；

d.洗脫液濃縮，干燥，即得香薷總黃酮。

步驟c中所述的大孔吸附樹(shù)脂類型為AB-8、HPD100、XDA-1中的一種。

通過(guò)體外腫瘤細(xì)胞抑制試驗(yàn)，觀察香薷總黃酮的抗腫瘤作用，結(jié)果表明香薷總黃酮對(duì)GLC4肺癌和COLO結(jié)腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。

本發(fā)明的有益效果通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證：

實(shí)驗(yàn)方法：

1、受試提取物：香薷總黃酮

2、細(xì)胞株：肺癌細(xì)胞株GLC4、結(jié)腸癌細(xì)胞株COLO。?

3、給藥劑量和方法

香薷總黃酮組：10mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。

陰性對(duì)照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。

陽(yáng)性對(duì)照組：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。

灌胃后2h，用HPLC檢測(cè)血漿藥物濃度。

4、種植瘤模型的建立與給藥

（1）皮下種植：分別將上述細(xì)胞培養(yǎng)至90%融合，收集細(xì)胞，取2×10^?6細(xì)胞懸液，注射至小鼠肋下皮下組織，于術(shù)后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計(jì)算藥物對(duì)模型動(dòng)物存活率的影響。

（2）肺內(nèi)種植瘤肺轉(zhuǎn)移模型：取2×10^?6細(xì)胞懸液注射至小鼠肺包膜內(nèi)，于術(shù)后15天取肺，測(cè)量瘤重和肺轉(zhuǎn)移數(shù)。

（3）給藥方式：種植瘤細(xì)胞同時(shí)給藥。

5、結(jié)果

結(jié)果如表1、表2和表3顯示，香薷總黃酮組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用，可延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期。

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表1??香薷總黃酮對(duì)種植瘤的抑制作用（n=20，????????????????????????????????????????????????±S）

表2??香薷總黃酮對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生率的影響（n=20，%）

表3??香薷總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠生存率的影響（n=20，%）

由表1、表2和表3可以看出，香薷總黃酮組用藥抑制腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的效果強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照組，可有效延緩實(shí)驗(yàn)小鼠的生存壽命，其效果明顯優(yōu)于陰性對(duì)照組。

本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時(shí)，將香薷總黃酮與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。

本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時(shí)，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。