[發明專利]一種檢測水產品中呋喃丹的Elisa試劑盒

在審

• 申請號: 201410548689.1
• 申請日: 2014-10-16
• 公開（公告）號: CN105572346A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 杜霞;劉靜;江振飛
• 申請（專利權）人: 鎮江先創生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及檢測呋喃丹殘留量的試劑盒，特別是檢測水產品中呋喃丹殘留量的酶聯免疫檢測(ELISA)試劑盒，ELISA(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay)是酶聯免疫吸附劑測定的簡稱，是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種酶免技術。

背景技術

呋喃丹是一種氨基甲酸酯類殺蟲劑和殺線蟲劑。1963年由美國創制，1967年推廣。純品為白色結晶，25℃時水中溶解度為700ppm，在中性和酸性條件下較穩定，在堿性介質中不穩定，水解速度隨PH值和溫度的升高而加快。按中國農藥毒性分級標準，呋喃丹高毒農藥，不能用在蔬菜和果樹上。呋喃丹對鳥類危害性最大，一只小鳥只要覓食一粒呋喃丹足以致命。受呋喃中毒致死的小鳥或其它昆蟲，被猛禽類、小型獸類或爬行類動物覓食后，可引起二次中毒而致死。

呋喃丹的另一個環境行為特點是它在土壤中的殘留期較長(降解半衰期為1～2個月)、在土壤中的移動性能較大(水溶解度為700mg/L)，在降水量大、地下水位淺的砂土地區易引起對地下水的污染，為此美國對呋喃丹使用作了一些地區性限制。危險特性：遇明火、高熱可燃。受熱分解放出有毒的氧化氮煙氣。

本試劑盒是應用ELISA技術研發的新一代藥物殘留檢測產品，與高效液相等儀器分析技術相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等特點，能最大限度地減少操作誤差和工作強度。

發明內容

本發明所要解決的問題是提供一種小巧輕便的呋喃丹殘留量檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準確、靈敏度高，成本低，穩定性好，需要的技木含量不高，可進行一次連續多個樣品中呋喃丹殘留量的測定，減少了檢測樣本所需要的時間。

本發明的技術方案是：一種檢測水產品中呋喃丹殘留量的酶聯免疫試劑盒，試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔中預包被偶聯抗原，樣本中殘留的呋喃丹和微孔中預包被的偶聯抗原競爭抗呋喃丹抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所舍殘留呋喃丹的含量成負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中呋喃丹的殘留量。

本發明所提供的一種檢測水產品中呋喃丹的ELTSA試劑盒，包括盒體和盒內的一塊96孔的酶標板、l4瓶試劑，其特征在于：酶標板是采用96孔試劑板作為固相載體，在試劑盒徼孔中預包被呋喃丹偶聯抗原制成的檢測板，l4瓶試劑分別為7瓶呋喃丹標準品溶液、酶標二抗、抗體工作液、顯色液A液、顯色液B液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復溶液。

還包括一張蓋板膜和放試劑的下凹瓶位、一個自封袋、一份說明書和一份質檢報告，盒體是硬紙盒：96孔試劑板為聚苯乙烯酶標板，放于真空鋁鉑袋內：蓋板膜是塑料硬膜；標準品溶液和高濃度標準品溶液均用黑色帽的白色PE塑料瓶，酶標二抗用紅色帽的白色PE塑料瓶，抗體工作液用綠色帽的白色PE塑料瓶，顯色液A液用白色帽的白色PB塑料瓶，顯色液B液用紅色帽的黑色PE塑料瓶，終止液用黃色帽的白色PE塑料瓶，濃縮洗滌液用透明帽的半透明PE塑料瓶，濃縮復溶液用藍色帽的半透明PE塑料瓶，下凹瓶位共l5個，由塑料泡沫制成。

酶標板是由外框支撐架及放置其上的可拆的12條酶標反應微孔條組成，每個可拆裝酶標反應微孔條有8個反應孔，每個反應孔預包被呋喃丹偶聯抗原；蓋板膜大小與酶標板橫切面大小一致；標準品溶液7瓶，lml／瓶；酶標二抗1瓶，7ml；抗體工作液l瓶，7ml；顯色液A液1瓶，7ml；顯色液8液l瓶，7m]；終止液l瓶，7ml；濃縮洗滌液l瓶，40ml；濃縮復溶液l瓶，50ml。

經實驗表明本試劑盒具有很高的靈敏度：水產品樣本的最低檢測限為1.0ug／kg，回收率為80％±20％，相對于其他呋喃丹檢測方法，本試劑盒所需儀器較少，且所需儀器同類實驗室一般均有配備，所需成本較低。

本發明的有益效果是：能快速、簡便、靈敏、準確地用于水產品中呋喃丹殘留量的檢測。

具體實施方式

一、試劑盒組裝