[發明專利]一種提高絨毛白蠟組培快繁增殖率的方法

有效

• 申請號: 201410546879.X
• 申請日: 2014-10-15
• 公開（公告）號: CN104381128A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 劉翠蘭;燕麗萍;李麗;王開芳;夏陽;王振猛
• 申請（專利權）人: 山東省林業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00;A01G31/00
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李健康

1.一種提高絨毛白蠟組培快繁增殖率的方法，步驟包括：(1)無菌苗建立，(2)快繁增殖；(3)組培苗生根；(4)煉苗移栽；

其特征在于：

步驟(1)所述無菌苗建立的方法是：選取無病蟲害籽粒飽滿的種子，去掉種皮，滅菌后接種到種子萌發培養基中，置于組培室，晝夜光照周期培養條件為：白天光照強度為2000～3000Lux，光照時間12～14h·d^-1，溫度25±1℃；夜間溫度18±1℃；7～10d后種子萌發，獲得無菌苗；

其中：所述種子萌發培養基配方是：WPM+6-BA0～0.3mg·L^-1+蔗糖25～35g·L^-1+瓊脂4～5g·L^-1，pH值5.8～6.0；

步驟(2)所述快繁增殖的方法是：將步驟(1)獲得的無菌苗剪成1～2cm長帶芽莖段，轉接于快繁增殖培養基中，以步驟(1)所述條件進行晝夜光照周期培養，25～30d后誘導形成叢生芽，增殖倍數8～10倍；

其中：所述快繁增殖培養基是以WPM培養基為基本培養基，于基本培養基中添加苯基噻二唑基脲(TDZ)、玉米素(ZT)、6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)四種植物生長調節劑制成，該快繁增殖培養基配方是：WPM+TDZ0.5～2.0mg·L^-1+ZT1.0～2.0mg·L^-1+6-BA0.5～1.5mg·L^-1+NAA0.5～1.0mg·L^-1+25～35mg·L^-1蔗糖+4～5mg·L^-1瓊脂，pH值5.8～6.0；

步驟(3)所述組培苗生根的方法是：待步驟(2)培養的試管苗長到3～5cm時，將其切成單株，接種到生根培養基中，以步驟(1)所述條件進行晝夜光照周期培養，15～20d后獲得生根植株，其生根數4～6條，根長1～3cm；

其中：所述生根培養基配方是：1/2WPM+0.7～2.1mg·L^-1IBA+0.01～0.03mg·L^-1NAA+0.1～0.2mg/L?ZT+18～25g·L^-1蔗糖+4～5g·L^-1瓊脂，pH值5.7～5.9；

上述1/2WPM是指培養基的組分中WPM大量元素減半及其余為WPM全量元素，其具體組分為：NH₄NO₃?400mg·L^-1，Ca(NO3)₂·4H₂O?556mg·L^-1，K₂SO₄?990mg·L^-1，CaCl₂·2H₂O?96mg·L^-1，KH₂PO4?170mg·L^-1，Na₂MoO₄·2H₂O?0.25mg·L^-1，MgS()₄·7H₂O370mg·L^-1，MnSO4·4H2O?22.4mg·L^-1，ZnSO4·7H₂O?8.6mg·L^-1，CuSO4·5H₂O0.25mg·L^-1，FeSO4·7H₂O?27.8mg·L^-1，Na₂-EDTA?37.3mg·L^-1，鹽酸硫胺素1.0mg·L^-1，煙酸0.5mg·L^-1，鹽酸比哆醇0.5mg·L^-1，肌醇100mg·L^-1，甘氨酸2.0mg·L^-1；

步驟(4)所述煉苗移栽的方法是：把步驟(3)中已生根的瓶苗轉移到煉苗溫室中適應1～2d，然后用清水逐棵洗去苗根部殘留的培養基，并將其移栽到裝有輕型基質的無紡布營養杯中，放置于遮光度60％～70％遮蔭網塑料大棚內，利用自動間歇噴霧裝置保持棚內空氣相對濕度在80％以上，煉苗8～10d后，棚內逐漸通風，再繼續培養10～12d，移栽于大田；

其中：所述無紡布營養杯中的輕型基質的成分以體積比計為：蛭石∶珍珠巖∶草炭土＝2∶3∶5，且在無紡布營養杯中輕型基質上面還撒放一層厚度為1.5～2cm的細沙。