[發明專利]MRE11基因突變檢測體系及其試劑盒有效
| 申請號: | 201410542661.7 | 申請日: | 2014-10-15 |
| 公開(公告)號: | CN104293956A | 公開(公告)日: | 2015-01-21 |
| 發明(設計)人: | 王明 | 申請(專利權)人: | 上海賽安生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海海頌知識產權代理事務所(普通合伙) 31258 | 代理人: | 任益 |
| 地址: | 200436 上海市*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | mre11 基因突變 檢測 體系 及其 試劑盒 | ||
1.一種MRE11基因突變檢測體系,其特征在于:包括用于檢測MRE11?A390G_1328C>G突變位點的正向檢測引物MRE1F和反向檢測引物MRE1R,以及用于檢測MRE11?P631T_2050C>A?突變位點或MRE11?R633Q_G2057G>A突變位點的正向檢測引物MRE23F和反向檢測引物MRE23R;
所述MRE1F的核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示;
所述MRE1R的核苷酸序列如SEQ?ID?No.2所示;
所述MRE23F的核苷酸序列如SEQ?ID?No.3所示;
所述MRE23R的核苷酸序列如SEQ?ID?No.4所示。
2.根據權利要求1所述的MRE11基因突變檢測體系,其特征在于:還包括陰性對照和陽性對照;
所述陰性對照分別是針對檢測MRE11?A390G_1328C>G突變位點的野生型對照一和針對檢測MRE11?P631T_2050C>A?突變位點或MRE11?R633Q_G2057G>A突變位點的野生型對照二;
所述陽性對照分別是針對檢測MRE11?A390G_1328C>G突變位點的突變型對照一、針對檢測MRE11?P631T_2050C>A?突變位點的突變型對照二和針對檢測MRE11?R633Q_G2057G>A突變位點的突變型對照三。
3.根據權利要求2所述的MRE11基因突變檢測體系,其特征在于:
所述野生型對照一是以未突變基因組為模板,以MRE1F和MRE1R為引物進行擴增,而獲得的產物;
所述野生型對照二是以未突變基因組為模板,以MRE23F和MRE23R為引物進行擴增,而獲得的產物。
4.根據權利要求3所述的MRE11基因突變檢測體系,其特征在于:所述突變型對照一是以含MRE11?A390G_1328C>G突變位點的基因組為模板,以MRE1F和MRE1MR為引物,以MRE1MF和MRE1R為引物,分兩組進行PCR擴增,再將獲得的兩組產物等量混合,以MRE1F和MRE1R為引物進行PCR擴增,再將獲得的產物,按體積比與野生型對照一進行混合,而獲得的混合物;
所述突變型對照二是以含MRE11?P631T_2050C>A突變位點的基因組為模板,以MRE23F和MRE2MR為引物,以MRE2MF和MRE23R為引物,分兩組進行PCR擴增,再將獲得的兩組產物等量混合,以MRE23F和MRE23R為引物進行PCR擴增,再將獲得的產物,按體積比與野生型對照二進行混合,而獲得的混合物;
所述突變型對照三是以含MRE11?R633Q_G2057G>A突變位點的基因組為模板,以MRE23F和MRE3MR為引物,以及MRE3MF和MRE23R為引物,分兩組進行PCR擴增,再將獲得的兩組產物等量混合,以MRE23F和MRE23R為引物進行PCR擴增,再將獲得的產物,按體積比與野生型對照二進行混合,而獲得的混合物;
所述體積比的比值是1∶9、1∶99或1∶999;
所述MRE1MF是覆蓋MRE11?A390G_1328C>G突變點堿基的正向檢測引物,所述MRE1MR是覆蓋MRE11?A390G_1328C>G突變點堿基的反向檢測引物;
所述MRE2MF是覆蓋MRE11?P631T_2050C>A突變點堿基的正向檢測引物,所述MRE2MR是覆蓋MRE11?P631T_2050C>A突變點堿基的反向檢測引物;
所述MRE3MF是覆蓋MRE11?R633Q_G2057G>A突變點堿基的正向檢測引物,所述MRE3MR是覆蓋MRE11?R633Q_G2057G>A突變點堿基的反向檢測引物。
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