[發明專利]一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法

在審

• 申請號: 201410542200.X
• 申請日: 2014-10-14
• 公開（公告）號: CN104330507A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 孟繁靜;廖飛;王凡
• 申請（專利權）人: 天津醫藥集團津康制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術領域

本發明涉及一種分析檢測方法，尤其涉及一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法。

背景技術

頭孢地尼合成步驟包括：縮合，脫保護和精制三步。在縮合反應一步中，由中間體7-AVCA和活性酯反應生成頭孢地尼。HPLC檢測反應液，7-AVCA<0.5％時,即判定為反應終點。當活性酯來源不同廠家時，帶入反應液的雜質也不同，當7-AVCA與相鄰兩雜質形成三連峰，無法準確積分得到7-AVCA的含量，即7-AVCA一直大于0.5％，無法準確判斷反應是否達到終點，直接影響產物的純度和質量。方便快捷的調整液相檢測方法，判斷反應終點對整個工藝流程尤為重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，用于實現對頭孢地尼合成過程中反應終點的快速、準確的判斷。

為實現上述目的，本發明的包括以下步驟：

1)取1mL頭孢地尼反應液，加入10mL乙腈稀釋，0.45μm有機針式過濾頭過濾；

2)流動相配置，A流動相：1000mL水相中含26mL?10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等于5.0，B流動相：乙腈；

3)以步驟2)中的流動相體積比A：B＝525～600：475～400，流速1mL/min，色譜柱：250mm×4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5μm，柱溫25度，檢測波長210～300nm，進樣體積10μL；

4)以頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5％為反應終點。

進一步，所述流動相體積比A：B＝600：400時，分離度大于1.5，完全分離。

進一步，所述頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min。

本發明的有益效果在于：在不改變其他色譜條件下，調整混合流動相各組分的比例，使7-AVCA與相鄰共存物之間的分離度大于1.5，達到完全的基線分離，能更加準確的判斷反應終點，方法簡便，可操作性強。

具體實施方式

本發明的包括以下步驟：、

1)取1mL頭孢地尼反應液，加入10mL乙腈稀釋，0.45μm有機針式過濾頭過濾；

2)流動相配置，A流動相：1000mL水相中含26mL?10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等于5.0，B流動相：乙腈；

3)以步驟2)中的流動相體積比A：B＝525～600：475～400，流速1mL/min，色譜柱：250mm×4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5μm，柱溫25度，檢測波長210～300nm，進樣體積10μL；

4)以頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小于0.5％為反應終點。

進一步，所述流動相體積比A：B＝600：400時，分離度大于1.5，完全分離。

進一步，所述頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min。

實施例：

取1mL頭孢地尼反應液，加入10mL乙腈稀釋，0.45μm有機針式過濾頭過濾；流動相采用：A流動相：1000mL水相中含26mL?10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等于5.0，B流動相：乙腈，A：B＝600：400；流速1mL/min，色譜柱：250mm×4.6mm不銹鋼柱、C18填料、填料粒徑5μm，柱溫25度，檢測波長210～300nm，進樣體積10μL；結果7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min，分離度大于1.5。

以上對本發明的一個實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，不能被認為用于限定本發明的實施范圍。凡依本發明申請范圍所作的均等變化與改進等，均應仍歸屬于本發明的專利涵蓋范圍之內。