[發明專利]一種小木通組織培養的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410540415.8
• 申請日: 2014-10-14
• 公開（公告）號: CN104255505A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京帝道農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.?一種小木通組織培養的快速繁殖方法，包括小木通無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養等，其主要步驟如下：

（1）取小木通葉片，對其進行消毒處理；

（2）取步驟（1）消毒處理過的小木通葉片接入N₆+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+Vc1g/L培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度22℃；

（3）取步驟（2）誘導出來的愈傷組織放入培養基N₆+6-BA0.5mg/L+KT0.7mg/L進行分化誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照2000lx，光期14h/d，溫度24℃；

（4）取步驟（3）獲得的分化出來的芽苗接入MS+NAA0.1-0.15mg/L中培養，獲得健壯的芽苗，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照8000lx，溫度24℃；

（5）取步驟（4）獲得的芽苗進行野外生根誘導。

2.?按照權利要求1所述的一種小木通組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（1）中所述小木通無菌葉片的獲得為，取小木通幼嫩的葉片，流水沖洗40min，超凈工作臺上10%的過氧化氫處理8min，無菌水沖洗6次至無殘留。

3.?按照權利要求1所述的一種小木通組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（5）中生根誘導的方法為長約3cm的芽苗取出，浸泡在0.2%的Cu離子溶液中浸泡3min，取出后浸泡在含有10-30mg/LNAA溶液的淺盤中1min，無菌水沖洗干凈，插入黃土：稻殼=2:1的營養袋中，定期噴水，除草，覆蓋65%的遮陰網，溫度28℃，濕度75%，并保持通風透氣。