[發(fā)明專利]一種白花酸藤果組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410540390.1
• 申請(qǐng)日: 2014-10-14
• 公開（公告）號(hào): CN104247663A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及白花酸藤果的組織培養(yǎng)，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

白花酸藤果，Embelia?ribes，紫金牛科，又名：信筒子、擬茶藨子、羊公板仔，小灌木，高90-120厘米，分枝，無(wú)毛，有時(shí)成蔓狀，葉卵形至長(zhǎng)橢圓形，長(zhǎng)5-7.5厘米，寬2-2.5厘米，先端漸尖，基部圓形，全緣，無(wú)毛，下面常綠帶白色；葉柄長(zhǎng)5-7毫米，有狹邊緣。圓錐花序頂生兼上部腋生，密被短柔毛；苞?。换O小，雜性，花梗長(zhǎng)3毫米；萼小，5深裂，銳頭；花瓣5，白色，長(zhǎng)約2毫米，有緣毛；雄蕊5，花絲著生于花瓣，藥卵狀長(zhǎng)橢圓形；子房上位，在雌花中呈卵形，在雄花中退化為圓錐形，花柱圓柱形，柱頭頭狀，漿果球形，種子球形，基部有孔，花期1月，分布廣東、廣西等地，果實(shí)含2.45%蒽貝素，又含維生素，其干燥果實(shí)有殺絳蟲作用，有效成分是蒽貝素，在印度用作避孕藥，能抑制子宮內(nèi)膜的堿性磷酸酶活性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是白花酸藤果組織培養(yǎng)的繁殖方法，本發(fā)明方法利用組織培養(yǎng)技術(shù)探索出建立白花酸藤果高效離體再生體系的途徑，實(shí)現(xiàn)白花酸藤果的快速繁殖，解決種苗短缺等問題，為白花酸藤果的工廠化生產(chǎn)提供技術(shù)支持，為白花酸藤果價(jià)值的實(shí)現(xiàn)、種質(zhì)的保存、轉(zhuǎn)基因的研究等奠定技術(shù)基礎(chǔ)。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案：

選擇生長(zhǎng)健壯的植株，切取5cm左右的外植體莖段，每3個(gè)芽剪成一段，用肥皂水浸泡8min，流水沖洗20min，浸泡于1g/L多菌靈＋1g/L百菌清＋1g/L殺毒釩溶液中，置于130r/min搖床上振蕩2.5h，沖洗干凈，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理25s，1g/L升汞處理6min，無(wú)菌水沖洗干凈，消毒處理過的無(wú)菌莖段接種到Ne+6-BA5.0mg/L+GA₃0.5mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25℃，光照強(qiáng)度1800lx，光照10h，誘導(dǎo)出來(lái)的芽苗長(zhǎng)到3cm左右接入Ne+2，4-D1.5-2.0mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照4500lx，光期12h/d，溫度25℃，培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽接入MS+IBA0.5-0.6mg/L+IAA0.5-0.6mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照6500lx，光期16h/d，溫度25℃。

采用本發(fā)明制備的白花酸藤果生根率高，利用率大，利于大規(guī)模種植。

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

選擇生長(zhǎng)健壯的植株，切取5cm左右的外植體莖段，每3個(gè)芽剪成一段，用肥皂水浸泡8min，流水沖洗20min，浸泡于1g/L多菌靈＋1g/L百菌清＋1g/L殺毒釩溶液中，置于130r/min搖床上振蕩2.5h，沖洗干凈，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理25s，1g/L升汞處理6min，無(wú)菌水沖洗干凈，消毒處理過的無(wú)菌莖段接種到Ne+6-BA5.0mg/L+GA₃0.5mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25℃，光照強(qiáng)度1800lx，光照10h，誘導(dǎo)出來(lái)的芽苗長(zhǎng)到3cm左右接入Ne+2，4-D1.5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照4500lx，光期12h/d，溫度25℃，培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽接入MS+IBA0.5mg/L+IAA0.5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照6500lx，光期16h/d，溫度25℃，生根率92%。

實(shí)施例2