[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)亞環(huán)己基二氧基庚烯醇的產(chǎn)朊酵母催化法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410537232.0
• 申請(qǐng)日: 2014-10-13
• 公開（公告）號(hào): CN104293847A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉均洪;李杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P17/04
• 分類號(hào): C12P17/04;C12R1/72
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種產(chǎn)朊假絲酵母細(xì)胞生物催化制備(2S,3S)-1,2-（亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇的方法，其特征在于反應(yīng)罐中加入磷酸鹽緩沖液，裝料系數(shù)為0.6-0.7，pH為6.2，加入吸附了底物S-亞環(huán)己基甘油醛與4-溴-1-丁烯的白土，使底物S-亞環(huán)己基甘油醛添加量為80-90?g/L，底物S-亞環(huán)己基甘油醛與底物4-溴-1-丁烯摩爾比為1，麥芽浸膏25-30?g，木糖14-16?g/L，支鏈化13碳格爾伯特醇聚氧乙烯醚為13-18g/L，121℃高壓滅菌30分鐘；冷卻至30-31℃時(shí)，加入濕酵母細(xì)胞使?jié)舛葹?5-28g/L，通氣比為0.10-14V/（V分鐘），進(jìn)行生物催化反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為82-90小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后，分別濾出細(xì)胞、白土，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液、萃取白土，合并乙酸乙酯萃取液和萃取白土的乙酸乙酯，蒸出乙酸乙酯，得到產(chǎn)物(2S,3S)-1,2-（亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率94-96％，產(chǎn)品收率92-94％，對(duì)映體過量率（ee%）97-98％。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于濕酵母細(xì)胞制備過程如下：產(chǎn)朊假絲酵母經(jīng)斜面、搖瓶、種子罐培養(yǎng)得到種子液；發(fā)酵罐加入培養(yǎng)液，裝料系數(shù)為0.6-0.7，121℃高壓滅菌30分鐘，冷卻至27-28℃，將產(chǎn)朊假絲酵母種子液接種至發(fā)酵罐，接種比例為6-6.5％，通氣比為1.4-1.6V/（V分鐘），27-28℃培養(yǎng)18-20小時(shí)，用過濾式離心機(jī)離心得到濕酵母細(xì)胞，用作生物催化反應(yīng)催化劑。

3.?權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于種子培養(yǎng)基成份為:?酵母提取物10?g/L，葡萄糖20?g/L，蛋白胨20?g/L，pH6;?配制固體培養(yǎng)基時(shí)添加15g/L的瓊脂粉；

培養(yǎng)液成份為：葡萄糖18-22?g/L，麥芽浸膏25-30?g/L，木糖8-10?g/L，(NH₄)₂SO_4?4.8-5.3?g/L，KH₂PO₄?9-11?g/L，MgSO₄.7H₂O?0.3-0.4?g/L，CaCl_2?0.35-0.4?g/L,硫酸銨0.2-0.25g/L，硫酸鎂0.3-0.4g/L,pH5.6。

4.?權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附了底物的白土制作方法為，將底物S-亞環(huán)己基甘油醛和4-溴-1-丁烯混溶，R-亞環(huán)己基甘油醛與4-溴-1-丁烯摩爾比為1，用白土吸收此溶液，即得到吸附了底物的白土，調(diào)節(jié)底物與白土用量，使得底物與白土的質(zhì)量比率為0.35-0.38。