[發明專利]一種酵母篩選培養基及其用途和篩選酵母菌株的方法

有效

• 申請號: 201410534744.1
• 申請日: 2014-10-11
• 公開（公告）號: CN104560751B
• 公開（公告）日: 2019-01-08
• 發明（設計）人: 高嵐;劉金勝;郭勇;劉穎;李寶石;藺建民
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司石油化工科學研究院
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12R1/865
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 劉國平;顧映芬

本發明公開了一種酵母篩選培養基，其中，該酵母篩選培養基含有葡萄糖和含乙酸根離子源。本發明還公開了上述酵母篩選培養基在篩選酵母菌株中的用途。此外，本發明還公開了一種篩選酵母菌株的方法，其中，該方法包括：將待篩選的酵母細胞在第一方面的酵母篩選培養基中進行培養。通過上述技術方案，本發明能夠篩選得到能耐受多重抑制物而具有高抗逆性的酵母菌株。

技術領域

本發明涉及一種酵母篩選培養基及其在篩選酵母菌株中的用途和利用該酵母篩選培養基篩選酵母菌株的方法。

背景技術

由于傳統化石能源用量急增，能源緊缺已成為世界性問題，能源多元化發展和加快可再生能源開發已成為世界各國的研發重點，其中，燃料乙醇的生產和應用在經濟發展和戰略安全上顯示出重大意義。以燃料乙醇等替代能源為代表的能源供應多元化戰略已成為我國能源政策的重要方向。纖維素是十分豐富而廉價的生物質原料，可以被降解為可發酵性糖，用于燃料乙醇的生產。大力發展生物質燃料乙醇作為可再生能源，有助于緩解石油資源短缺，改善大氣環境等問題，在穩定糧食生產、促進農業生產與消費的良性循環和可持續發展等方面具有積極作用。

釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作為單細胞真核生物，具有易培養、生長周期短的特點，已廣泛應用于異源基因的表達。雖然普通釀酒酵母能夠高效利用葡萄糖產乙醇，但對發酵液中的抑制物和高濃乙醇耐受性(Almeida J R M et al.,2007)較差，特別是對纖維素水解液中的抑制成分敏感，使釀酒酵母無法成為木質纖維素乙醇生產的優勢菌株。其次，纖維素乙醇生產中，纖維素原料預處理過程產生和殘留的降解物會對后續菌株發酵造成不同程度的抑制，其中乙酸、糠醛、酚類和SO₄^2-等抑制因子對酵母有較強毒害作用，會顯著抑制細胞的生長及其發酵性能。

目前，在纖維素乙醇生產菌種——釀酒酵母的研究領域，大多集中于將各種實驗室缺陷型菌種為研究對象進行改造，而缺乏能夠應用于生產的野生型酵母模型，能夠耐受多重抑制物、具有高抗逆性的釀酒酵母具有更強的實用性，顯然，研究新的能夠用于篩選酵母菌株的培養基對篩選獲得具有上述特性的酵母模型極為重要。

發明內容

本發明的目的是克服現有方法篩選得到的釀酒酵母難不能耐受多重抑制物而抗逆性低的缺陷，提供一種用于篩選且抗逆性高的酵母菌株的酵母篩選培養基及其在篩選酵母菌株中的用途和利用該酵母篩選培養基篩選酵母菌株的方法。

本發明的發明人發現，雖然釀酒酵母能夠高產乙醇，但是對發酵液中的抑制物抗性較差，這使得釀酒酵母無法成為木質纖維素乙醇生產的優勢菌株。基于此，本發明的發明人進一步對抑制因子和釀酒酵母的關系進行的研究，結果發現，采用含有葡萄糖和含乙酸根離子源的培養基進行篩選，得到的酵母菌株能夠在多重抑制物存在下穩定發酵產乙醇。因此，為了實現上述目的，第一方面，本發明提供了一種酵母篩選培養基，其中，該酵母篩選培養基含有葡萄糖和含乙酸根離子源。

第二方面，本發明提供了上述第一方面的酵母篩選培養基在篩選酵母菌株中的用途。

第三方面，本發明提供了一種篩選酵母菌株的方法，其中，該方法包括：將待篩選的酵母菌株在第一方面的酵母篩選培養基中進行培養。

通過上述技術方案，本發明的酵母篩選培養基能夠耐受多重抑制物而具有高抗逆性的酵母菌株。

本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。

具體實施方式

以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。

在本發明中，在未作相反說明的情況下，使用的術語“抗逆性”是指微生物在偏離其最佳生長條件下的環境中的生長和發酵能力，比如較高或較低的溫度，較高或較低的pH，較高或較低的滲透壓，較高的反饋抑制，有毒物質的存在等環境。