[發明專利]一種檢測大豆凝集素的酶聯免疫試劑盒

在審

• 申請號: 201410531004.2
• 申請日: 2014-10-10
• 公開（公告）號: CN105572335A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 洪霞;張淑雅
• 申請（專利權）人: 江蘇維賽科技生物發展有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測大豆凝集素的酶聯免疫試劑盒，其特征在于：由多孔包被板，緩沖液，大豆凝集素標準品，大豆凝集素的抗體凍干品，酶標記的羊抗鼠抗體，洗滌液所組成。

2.一種根據權利要求1所述檢測大豆凝集素的酶聯免疫試劑盒的檢測方法，包括，免疫原、包被原和單克隆抗體的制備及樣本前處理，其特征在于：

（1）將大豆凝集素與牛血清白蛋白偶聯，得到免疫原；

（2）選擇兔紅細胞膜包被酶標板作為功能ELISA捕獲大豆凝集素的載體，得到包被原；

（3）用步驟（1）的免疫原免疫小鼠，通過雜交瘤技術，得到分泌抗SBA的單克隆抗體的雜交瘤細胞株；

（4）以體內誘生腹水法大量制備抗體，使用ProteinG柱進行純化，獲得抗SBA的單克隆抗體IgG；

（5）用步驟（2）的包被原包被固相載體；

（6）取適量待測大豆樣品，用超細粉碎機粉碎，取lg待鍘樣品加10ml生理鹽水，室溫

磁力攪拌浸提2h，9000rpm離心l5min，取上清備用，得到待測物；

（7）將步驟(6)的待榆物進行酶聯免疫，對照標準曲線計算樣品中的大豆凝集素的含量。

3.根據權利要求l所述檢測大豆凝集素的酶聯免疫試劑盒的檢測

方法，其特征在于：所述的固相載體是多孔包被板，采用48或者96孔的多微孔包被板作為固相載體。

4.根據權利耍求l所述檢測大豆凝集素的酶聯免疫試劑盒的檢測方法，其特征在于：取包被有SBA的的微孔包被板，加入50u]的SBA或處理好的樣品到各自的微孔中，加50ul以緩沖液稀釋的SBA抗體，25℃反應0.5小時，用洗滌液洗3次，加以緩沖液稀釋的l00uL羊抗鼠抗體，25℃反應0.5小時，用洗滌液洗六3次，加底物A、B各50uL，25℃反應15min后終止，測量其吸光度值，從標準曲線計算樣品中的SBA的含量。