[發明專利]基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器

有效

• 申請號: 201410525736.0
• 申請日: 2014-09-30
• 公開（公告）號: CN104297306B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: 王光麗;束軍仙;董玉明;楊亞鑫;張穎;劉志偉
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于：?

a、以巰基己醇和帶有羧基的化合物共同作為表面修飾劑制備水溶性PbX(X代表硫、硒)量子點。具體步驟為：將一定量的巰基己醇和帶有羧基的化合物與水溶性鉛鹽溶液混合后，用1mol/L的NaOH溶液調節溶液的pH為堿性；然后通入高純氮氣30min后，加入Na₂S(或者NaHSe)水溶液，繼續通N₂攪拌，在一定溫度下加熱反應一定時間，得水溶性PbX(X代表硫、硒)量子點。?

b、將經過預處理的ITO玻璃片浸在含有0.1mmol/L?NaCl的2％PDDA聚合物的溶液中，10分鐘后用去離子水沖洗電極表面；然后再浸入到水溶性PbX(X代表硫、硒)量子點溶液中，10分鐘后用去離子水清洗電極表面。以上步驟可將PbX(X代表硫、硒)量子點修飾到ITO電極上。?

c、以制得的PbX(X代表硫、硒)量子點修飾的ITO電極作為工作電極，通過縮合反應將捕獲核酸序列所帶NH₂與電極表面PbX(X代表硫、硒)量子點表面的COOH共價相連，從而將捕獲探針固定到電極表面。具體操作為將PbX(X代表硫、硒)量子點修飾電極浸在含有20mg?EDS和10mg?NHS的1mL水溶液中反應1小時，再用清洗液(含有0.02％Tween-20的0.01mol/L?pH?7.4的Tris-HCl緩沖溶液)沖洗電極表面。然后，滴加25μL?1.0×10^-6mol/L捕獲核酸序列在4度下反應過夜，用清洗液沖洗電極表面；接著用25μL封閉液(含有0.1mol/L?KCl、1.0mmol/L單乙醇胺或者0.02％Tween-20以及3％BSA的0.01mol/L?Tris-HCl(pH?7.4)緩沖溶液)封閉30min以除去電極表面的活性位點，用清洗液沖洗；將電極放入含有0.05mol/L?KCl和0.1mol/L?NaCl的一定pH的緩沖溶液組成電解質溶液中，以銀/氯化銀(飽和KCl)電極作為參比電極，鉑絲作為對電極，一定電位下在自制的光電化學測定儀器上進行光電流測定。?

d、隨后，將電極表面加入不同濃度的待測目標物和1.0×10^-6mol/L?hemin后反應30-60分鐘，用清洗液沖洗；將電極放入電解質溶液中觀察光電流的變化情況。?

2.根據權利要求1所述的基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于所述的PbX(X代表硫、硒)量子點的表面修飾劑為巰基己醇和帶有羧基的化合物組成的混合物，帶有羧基的化合物選自巰基乙酸，巰基丙酸，半胱氨酸，二巰基丁二酸，油酸，聚丙烯酸，表面修飾劑的總量為鉛離子的物質的量的3-20倍，帶有羧基的化合物和巰基己醇的物質的量之比為2∶1-25∶1。?

3.根據權利要求1所述的基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于合成PbX(X代表硫、硒)量子點時所選用的反應溫度為50-100度，反應時間為1-6小時。?

4.根據權利要求1所述的基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于光電化學測定時所使用的緩沖溶液為含有0.05mol/L?KCl和0.1mol/L?NaCl的Tris-HCl緩沖溶液，緩沖溶液的pH為6.0-9.0。?

5.根據權利要求1所述的基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于光電流測定時采用的電壓為(-0.3)-(+0.3)V(相對于Ag/AgCl參比電極)。?

6.根據權利要求1所述的基于G-四面體/hemin的光電化學多功能傳感器，其特征在于光電化學測定的目標物為DNA，凝血酶，三磷酸腺苷，單磷酸腺苷，鉛(II)離子。?