[發明專利]一種應用于水產養殖環境改良的微生物制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201410517092.0
• 申請日: 2014-09-30
• 公開（公告）號: CN104498382B
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: 徐長安;唐旭;劉源森;林凌;方衛東;黃仕新
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C12R1/125
• 代理公司: 廈門市新華專利商標代理有限公司35203
• 代理人: 朱凌

技術領域

本發明屬于水產養殖水質改良技術領域，尤其涉及一種應用于水產養殖環境改良的微生物制劑及其制備方法。

背景技術

隨著水產養殖業的發展，池塘逐年老化，養殖水質、底質受到嚴重污染，導致養殖病害頻繁發生，水質改良成為健康養殖的主要措施之一。

近年來，水質改良劑的研究也在不斷的發展中。傳統的水質改良劑利用物理和化學的原理，通過吸附或增加水體溶氧來改善水質，效率較低，無法解決目前高密度養殖模式下的水質凈化的要求，因此目前在養殖水質改良方面使用較多的是生物水質改良劑，主要成分為: 光合細菌、芽孢桿菌、乳酸桿菌、硝化細菌、反硝化細菌、酵母菌、假單胞菌、雙歧桿菌等，其中光合細菌、芽孢桿菌、硝化細菌、反硝化細菌為常見的微生態水產養殖水質改良劑制劑；如專利號為CN200910044291.3、名稱為“一種水質改良劑或飼料、肥料增效劑及其生產方法”的中國發明專利中就揭露了以芽孢桿菌、光合細菌、硝化細菌、乳酸菌、放射菌和酵母菌組成的微生物制劑，該微生物制劑中生物生長促進劑的含量為50-100億個/克，功效是：1、可促進浮游動植物的生長繁殖速度，提高浮游植物對水體中的氮、磷、鉀等物質的轉化吸收能力，從而提高肥料效果，提高漁業效益。2、可提高氮、磷、鉀等物質向浮游植物的轉化效率，促進浮游植物生長，預防藻類水華的發生。

目前世界上普遍認為生物防治可能是解決水產養殖病害較為行之有效的途徑之一，但國內外還暫未發現專門防水產養殖中各種病害的生物殺菌藥劑，所以，研發出一種能夠有效防治水產養殖病害的微生物菌劑是本領域技術人員所迫切希望地。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種應用于水產養殖環境改良的微生物制劑，并同時揭露了該微生物制劑的制備方法。

本發明是通過以下技術方案解決上述技術問題的：

一種應用于水產養殖環境改良的微生物制劑，其由以下質量百分數的組分組成：

經培養、濃縮及固化后的菌株PSB20 5-25%；

經擴培、固化后的菌株ND0410-25%；

余量為載體；

其中：

所述載體為硅藻土或沸石粉，且硅藻土、沸石粉的粉碎細度均為120-250目；

所述菌株PSB20為沼澤紅假單胞菌菌株（Rhodopseudomonas palustris）PSB20，于2014年09月02日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No: 9632；

所述菌株ND04為枯草芽孢桿菌菌株（Bacillus subtilis）ND04，于2014年08月25日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No: 9545。

同時揭露了上述應用于水產養殖環境改良的微生物制劑的制備方法，該制備方法的具體步驟為：

（1）沼澤紅假單胞菌菌株PSB20的培養：取所述的沼澤紅假單胞菌菌株PSB20并將其接種至培養基Ⅰ中，且于25-35℃、2500-3500lx下光照培養72-144h，當培養液的OD₆₆₀達1.5-2.2時即制得種子液；接著按5-20%接種量將種子液接種至透明塑料農膜，于30~35℃、并利用太陽光光照進行塑料薄膜培養，培養時間3~5天，且陰天、及夜晚時采用60W/25L白熾燈照射，當菌液呈現深紅則培養完成；

（2）沼澤紅假單胞菌菌株PSB20的濃縮及固化：往步驟（1）培養好獲得的菌液中添加絮凝劑，靜置過夜絮凝，去上清；接著依次添加保護劑、權利要求1所述的載體，然后于30-40℃下風干，得固化后的沼澤紅假單胞菌菌株PSB20，備用；

其中，絮凝劑的添加量為步驟（1）培養好獲得的菌液體積的5-15%；保護劑的添加量為：每1L經絮凝后得到的濃稠菌液中添加保護劑0.1-0.5g；載體的添加量為：每1L經絮凝后得到的濃稠菌液中添加載體50-2000g；且載體為粉碎細度120-250目的硅藻土或沸石粉；

（3）枯草芽孢桿菌菌株ND04的擴培及固化：取所述的枯草芽孢桿菌菌株ND04并將其接種至培養基Ⅱ中，且于30-40℃、150-200rpm下培養24-48h，制得種子液；接著將所得種子液按5-10%接種量接種至發酵培養基，于30-40℃、pH6.5-8、50-200 rpm條件下發酵培養24-48h；發酵結束后的發酵液于50-70℃下烘干，得固化后的枯草芽孢桿菌菌株ND04，備用；