[發(fā)明專利]一種地屈孕酮中間體的分析方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410512819.6
• 申請(qǐng)日: 2014-09-30
• 公開（公告）號(hào): CN104237417B
• 公開（公告）日: 2017-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許乃茜;劉亞寧;梁佶軒;張芝利
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華潤(rùn)紫竹藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及地屈孕酮中間體的分析方法，具體涉及孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮的分析方法。

背景技術(shù)

地屈孕酮為6-去氫逆孕酮，是一種口服孕激素，可使子宮內(nèi)膜進(jìn)入完全的分泌相，從而防止由雌激素引起的子宮內(nèi)膜增生和癌變風(fēng)險(xiǎn)。其化學(xué)結(jié)構(gòu)與天然孕酮黃體酮最為接近，但體內(nèi)生物活性較黃體酮更高；口服低劑量生效，且無雌激素、雄激素及腎上腺皮質(zhì)激素作用；不產(chǎn)熱，且對(duì)脂代謝物影響，安全性和耐受性更佳。

作為具有高安全性的孕酮，地屈孕酮于1961年全球上市，臨床用于治療閉經(jīng)、子宮內(nèi)膜異位、預(yù)防功能性出血和先兆性流產(chǎn)。

地屈孕酮原料藥開發(fā)的一條合成路線如下：

孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮作為地屈孕酮原料開發(fā)的一種重要中間體，目前沒有任何文獻(xiàn)有關(guān)于該中間體的分析方法的報(bào)道。

由于光反應(yīng)的特殊性，對(duì)孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮的質(zhì)量要求較高。經(jīng)過試驗(yàn)，以乙腈作為流動(dòng)相的組分(如：乙腈和水或者乙腈、甲醇和水為流動(dòng)相)時(shí)，可以將孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮與雜質(zhì)孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮分離，但始終無法將其他雜質(zhì)與孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮很好的分離(見附圖1)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中沒有關(guān)于孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮分析方法的問題，本發(fā)明提供一種全新的地屈孕酮中間體孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮的分析方法。

由于主要雜質(zhì)孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮的紫外吸收為末端，按照本領(lǐng)域的常規(guī)知識(shí)，紫外吸收為末端時(shí)，流動(dòng)相首選乙腈。發(fā)明人開創(chuàng)性的采用甲醇和水作為流動(dòng)相對(duì)孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮進(jìn)行分析，不但將孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮和孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮，還發(fā)現(xiàn)另外一種主要雜質(zhì)：孕甾-4，6-二烯-3，20-二乙二醇縮酮，并與之很好分離。

按照本發(fā)明的方法分析按照上述背景技術(shù)中的方法制備得到的孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮，發(fā)現(xiàn)其中含有的主要雜質(zhì)為：孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮和孕甾-4，6-二烯-3，20-二乙二醇縮酮，其中孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮為制備孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮的原料。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮的分析方法：

a、色譜柱：選用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，

b、流動(dòng)相：以甲醇和水為流動(dòng)相，

c、檢測(cè)波長(zhǎng)為：200-265nm，

d、取檢測(cè)樣品適量，精密稱定，用乙腈溶解并稀釋成一定濃度的溶液，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

上述b中流動(dòng)相甲醇與水的體積比為80∶20，流速為1ml/min。

上述d中溶液的濃度為0.4mg/ml-0.7mg/ml，優(yōu)選0.5mg/ml和0.6mg/ml。

上述d中記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的1.5-10倍，優(yōu)選2倍和2.5倍。

本發(fā)明的有益效果為：

1、設(shè)備要求不高，使用普通的液相色譜即可。

2、流動(dòng)相選用的甲醇和水普通易得，可行性高。

3、操作過程簡(jiǎn)單方便。

4、本發(fā)明突破了常規(guī)，對(duì)紫外吸收為末端的化合物采用甲醇和水為流動(dòng)相，分離效果比采用乙腈為流動(dòng)相好。

附圖說明

附圖1：以乙腈和水為流動(dòng)相孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮與主要雜質(zhì)的分離圖譜

附圖2：以甲醇和水為流動(dòng)相孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮與主要雜質(zhì)的分離圖譜

附圖中：主峰：為孕甾-5，7-二烯-3，20-二乙二醇縮酮峰；雜質(zhì)1：為孕甾-5-烯-3，20-二乙二醇縮酮峰；雜質(zhì)2：為孕甾-4，6-二烯-3，20-二乙二醇縮酮峰。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

色譜條件：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(waters symmetry C18 4.6×100mm，3.5um)，

流動(dòng)相：甲醇和水的體積比為：80∶20，

進(jìn)樣量：20μl，

檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm

流速：1ml/min，