[發明專利]一種采用卵生型手段繁育幼生型牡蠣的方法

有效

• 申請號: 201410509937.1
• 申請日: 2014-09-28
• 公開（公告）號: CN104381158B
• 公開（公告）日: 2017-02-08
• 發明（設計）人: 張躍環;喻子牛;張揚;李軍
• 申請（專利權）人: 中國科學院南海海洋研究所
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司44001
• 代理人: 劉明星

技術領域：

本發明屬于海洋農業中貝類遺傳繁育技術領域，具體涉及一種采用卵生型手段繁育幼生型牡蠣的方法。

背景技術：

牡蠣屬于軟體動物門，雙殼綱，珍珠貝目，牡蠣科，是一種重要的海洋生物資源，其肉味鮮美、富含多種人體必需氨基酸。為世界最重要的海水養殖經濟種類之一，其養殖的總產量和單位面積產量在所有的貝類養殖品種中位居首位(張躍環，2012)。我國是牡蠣養殖大國，2010-2012年產量在350-380萬噸之間；它占養殖貝類產量的35％，海水養殖總產量的25％，世界產量的70％以上(中國漁業年鑒2013)。

在我國，牡蠣科至少包括5個屬，分別為巨蠣屬(Crassostrea)、牡蠣屬(Ostrea)、小蠣屬(Saccostrea)、齒蠣屬(Dendostrea)、舌骨牡蠣屬(Parahyotissa)等(夏建軍，2008)。其中，有趣的是，牡蠣屬種類繁殖方式均為幼生型，而其它屬種類均為卵生型。卵生型(Oviparous?type)是指動物的受精卵在母體外獨立發育，胚胎發育過程完全依靠卵細胞自身卵黃營養，可分為直接產卵排精及交配后產卵兩種形式，絕大多數的貝類均屬于這種繁殖方式。幼生型(Larvae?type)牡蠣在繁殖時，精卵在鰓腔中受精，發育至面盤幼蟲離開母體，經過浮游階段，附著變態。它包括牡蠣屬中的密鱗牡蠣(O.denselamellosa)、歐洲牡蠣(O.edulis)、希臘牡蠣(O.lurida)等(王如才等，2008)。那么，能否改變幼生型牡蠣繁殖方式，利用卵生型手段進行幼生型牡蠣的人工繁育，成為本發明的創新點。

發明內容：

本發明的目的是提供一種采用卵生型手段繁育幼生型牡蠣的方法，其可以改變幼生型牡蠣繁殖方式，提高其種群資源數量，大規模生產其苗種。

本發明的采用卵生型手段繁育幼生型牡蠣的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a、親本采集：在自然海區采集野生的牡蠣屬幼生型牡蠣作為繁殖群體，該類牡蠣長相比較獨特，右殼殼頂部較光滑鱗片愈合，其它鱗片密薄而脆，緊密地以覆瓦狀排列，為了確保該親本準確性，最好進一步采用分子手段進行物種鑒定；

b、性腺促熟：以自然條件下性腺發育較好的步驟a的繁殖群體或者促熟的步驟a的繁殖群體作為親本，自然條件下性腺發育較好的牡蠣群體可以減少促熟時間，促熟方式可以采用室內促熟，也可以采用室外生態促熟。無論是哪一種促熟方式，均要保證餌料充足、水質清新、環境條件適宜。

c、精卵分離：待親本性腺成熟，分離精卵，之后進行受精，獲得受精卵；性腺成熟的標志：少數親本個體鰓腔中有受精卵或者正在發育的胚胎。由于大部分幼生型牡蠣屬于雌雄同體，所以在獲得單體精卵時要格外小心。卵子收集方法：將成熟性腺解剖在鹽度3-5ppt水中，浸泡2-5min，將其精子殺死；之后經過200目篩絹網過濾，去除大的組織塊，400目篩絹網濃縮，去除小的碎組織塊及死亡精子；最后，濾液放置于鹽度為27-30ppt海水中進行30-60min浸泡激活卵子，激活成功的標準是卵變圓，生發泡消失。精子收集方法，在卵子激活成功后，通過鏡檢選擇精子活力好的個體性腺，經過400目篩絹網過濾，去除卵子及大的組織塊，濾液即為精子，該方法可以有效的收集純度較高的精子；之后在海水激活5-15min，選取精子活性比例高的個體作為父本。受精前，檢查卵子是否被精子污染，棄掉被污染個體卵液，使用尚未受精且激活好的卵子。最后，將精子倒入卵液中受精，每個卵子周圍有3-5個精子比較合適；

d、子代培育：采用充氣方式孵化受精卵，孵化密度控制在≤50個/mL，受精卵在溫度28.2-29.4℃，鹽度27-30ppt條件下，經過36h左右到達D形幼蟲。對D形幼蟲采用260目篩絹網選優(D形幼蟲不能濾過260目篩絹網)，之后按照常規方法培養子代，即可獲得大量該類牡蠣苗種。

步驟a所述的幼生型牡蠣指的是牡蠣屬中的密鱗牡蠣、希臘牡蠣、歐洲牡蠣等，它們繁殖時精卵在鰓腔中受精，待受精卵發育至D形幼蟲階段排出體外，經過浮游階段之后附著變態。